Phospho-IRF3-S386 Kaninchen pAb für WB und ELISA - Q14653

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von IRF3

• Wichtiger transkriptioneller Regulator von Typ-I-Interferon (IFN)-abhängigen Immunantworten, der die Expression von IFN-α/β und IFN-stimulierten Genen (ISGs) durch Bindung an Interferon-stimulinierte Response-Element (ISRE)-Promotoren steuert.
  Verwandte Referenzen: PMID:11846977, PMID:16846591, PMID:16979567, PMID:20049431

• Liegt in inaktiver monomeren Form im Zytoplasma nicht infizierter Zellen vor; nach viraler Infektion oder TLR-Signalgebung phosphorylieren die Kinasen IKBKE und TBK1 IRF3 an Schlüsselresten einschließlich S386, was eine Konformationsänderung, Dimerisierung und nukleäre Translokation induziert.
  Verwandte Referenzen: PMID:22394562, PMID:25636800, PMID:27302953

• Im Zellkern assoziiert phosphoryliertes IRF3 mit CREBBP und bildet den dsRNA-aktivierten Faktor 1 (DRAF1)-Komplex, der die Transkription von Typ-I-IFN- und ISG-Genen stark aktiviert.
  Verwandte Referenzen: PMID:16154084, PMID:33440148

• Spielt eine entscheidende Rolle sowohl in der frühen als auch späten Phase der IFN-Geninduktion und kann unterschiedliche Genexpressionsprogramme in Makrophagen aktivieren, einschließlich der Fähigkeit, signifikante Apoptose in primären Makrophagen zu induzieren.
  Verwandte Referenzen: PMID:16846591, PMID:25609812

• Wichtiger Transkriptionsfaktor in der IFN-Antwort während einer SARS-CoV-2-Infektion, der die antivirale Abwehr vermittelt.
  Verwandte Referenzen: PMID:33440148

• Die subzelluläre Lokalisation wechselt zwischen Zytoplasma, Zellkern und Mitochondrium; die mitochondriale Rekrutierung (über TOMM70:HSP90AA1) kann Apoptose über BAX auslösen.
  Verwandte Referenzen: PMID:25609812

• Wird konstitutiv in einem breiten Spektrum von Geweben exprimiert; das Gen unterliegt alternatives Spleißen und das Protein ist Gegenstand von Acetylierung, Phosphorylierung und ubiquitin-ähnlicher Konjugation.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid, das der Phosphorylierungsstelle S386 entspricht; wir empfehlen die Verwendung von Phosphatase-Inhibitoren während der Probenlyse, um das Phosphorylierungssignal zu erhalten.
• Für den Western Blot ist eine Bande um 47 kDa zu erwarten; fügen Sie einen Nicht-Phospho-Peptid-Blockierungskontrolle hinzu, um die Phospho-Spezifität zu bestätigen.
• Beim ELISA kann eine direkte Beschichtung mit dem Phosphopeptid oder die Fangung des Ziels aus Lysaten verwendet werden; für ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis wird eine Titration des Antikörpers empfohlen.

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