Phospho-IκBα-S36 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P25963

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: IκBα-Funktion und -Lokalisierung

• IκBα (NF-kappa-B-Inhibitor Alpha, auch bekannt als MAD3 oder NFKBI) ist ein Schlüsselregulationsprotein, das NF-κB-Transkriptionsfaktoren hemmt, indem es RELA/p65- und NFKB1/p50-Dimere im Zytoplasma zurückhält, indem es ihre nukleären Lokalisierungssignale maskiert. Verwandte Referenzen: PMID:1493333 PMID:36651806 PMID:7479976

• Nach zellulärer Stimulation durch Immun- und proinflammatorische Signale unterliegt IκBα einer Phosphorylierung an Ser32 und Ser36, was seine Ubiquitinierung und anschließende proteasomale Degradation auslöst, wodurch NF-κB-Dimere freigesetzt werden, um in den Kern zu translozieren und die Transkription zu aktivieren. Verwandte Referenzen: PMID:7479976 PMID:7628694 PMID:7796813

• IκBα ist ein Mitglied der IκB-Familie von Inhibitoren, die durch Ankyrin-Wiederholungen charakterisiert ist, die Protein-Protein-Interaktionen mit NF-κB-Dimeren vermitteln.

• Subzellulär wandert IκBα zwischen dem Zytoplasma und dem Kern, aber seine vorherrschende Lokalisierung ist zytoplasmatisch, wo es inaktive NF-κB-Komplexe sequestriert.

• Posttranslationale Modifikationen von IκBα umfassen Phosphorylierung, Ubiquitinierung (Ubl-Konjugation), Hydroxylierung und Isopeptidbindungsbildung, die seine Stabilität und Aktivität regulieren.

• Das Gen NFKBIA ist bei Mutationen mit ektodermaler Dysplasie und anderen immunbedingten Störungen verbunden, was seine kritische Rolle in der Immunhomöostase unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um Ser36, das eine hohe Spezifität für die phosphorylierte Form gewährleistet. Eine Blockierung mit nicht-phosphoryliertem Peptid kann verwendet werden, um die Phospho-Spezifität im WB zu bestätigen.
• Für WB sollten Sie in Erwägung ziehen, Zellen zu stimulieren (z. B. mit TNF-α oder IL-1β), um die Phosphorylierung und Degradation von IκBα zu induzieren, was mit diesem Antikörper überwacht werden kann.
• Bei IHC-P sollten Antigen-Retrieval- und Permeabilisierungsprotokolle optimiert werden; validieren Sie die Färbung in Gewebeschnitten, die bekanntermaßen eine aktivierte NF-κB-Signalgebung exprimieren.
• Für ELISA kann dieser Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; die Kreuzreaktivität mit nicht-phosphoryliertem IκBα sollte je nach Assay-Format bewertet werden.
• Da der Antikörper mit Mensch, Maus und Ratte reagiert, eignet er sich für translationswissenschaftliche Studien über diese Spezies hinweg; fügen Sie immer geeignete positive und negative Kontrollen ein.

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