Phospho-IGF1R-Y1165/1166/INSR-Y1189/1190 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper - P08069 / P06213

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Phospho-IGF1R/INSR

• Der Insulin-ähnliche Wachstumsfaktor 1-Rezeptor (IGF1R) ist eine Rezeptor-Tyrosinkinase, die IGF1 mit hoher Affinität sowie IGF2 und Insulin mit geringerer Affinität bindet. Er spielt eine zentrale Rolle für Zellwachstum und Überleben und ist entscheidend für Tumortransformation und das Überleben maligner Zellen.
• Die Ligandenbindung löst die Autophosphorylierung des Rezeptors an Tyrosinresten aus, darunter Y1165 und Y1166 in der Aktivierungsschleife. Dies führt zur Rekrutierung und Tyrosinphosphorylierung von Adapterproteinen wie IRS1/2, Shc und 14-3-3-Proteinen.
• Phosphoryliertes IRS1 aktiviert zwei wichtige Signalkaskaden: den PI3K-AKT/PKB-Weg, der Apoptose hemmt und die Proteinsynthese über mTOR fördert, sowie den Ras-MAPK-Weg, der die Zellproliferation antreibt.
• IGF1R signalisiert auch über den JAK/STAT-Weg; die Aktivierung von STAT3 kann für die transformierende Aktivität des Rezeptors essenziell sein. Zusätzlich können JNK-Kinasen aktiviert werden, und IGF1 übt über ASK1 eine inhibitorische Wirkung auf JNK aus.
• IGF1R kann hybride Rezeptoren mit dem Insulinrezeptor (INSR) bilden. Diese Hybride binden IGF1 mit hoher Affinität; abhängig von der INSR-Isoform können sie eine unterschiedliche Bindung an IGF2 und Insulin aufweisen. Verwandte Referenzen: PMID:12138094, PMID:16831875
• Subzellulär ist IGF1R an der Zellmembran lokalisiert.
• Es wird in einer Vielzahl von Geweben exprimiert und oft in Tumoren überexprimiert, darunter Melanome und Krebse des Dickdarms, der Bauchspeicheldrüse, der Prostata und der Niere. als hybrider Rezeptor mit INSR findet man ihn unter anderem in Muskel, Herz, Niere und Fettgewebe.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Autophosphorylierung, Spaltung an basischen Resten, Disulfidbrückenbildung, Glykosylierung und Ubiquitinierung. Das berechnete Molekulargewicht des unverarbeiteten Präkursors beträgt etwa 154 kDa.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid, das die Phosphorylierungsstellen der Aktivierungsschleife (Y1165/Y1166) des menschlichen IGF1R umfasst, die in INSR (Y1189/Y1190) konserviert sind. Dieses Design zielt auf die katalytisch aktive, phosphorylierte Form beider Rezeptoren ab.
• Fügen Sie für die Western-Blot-Analyse Phosphatase-Inhibitoren zu Ihrem Lysepuffer hinzu, um die Phosphorylierung zu erhalten. Die vorhergesagten Molekulargewichte für IGF1R- und INSR-Präkursoren betragen etwa 154 kDa bzw. ~155/156 kDa; reife Rezeptoren können aufgrund proteolytischer Prozessierung als mehrere Banden erscheinen.
• Bei der Einrichtung von ELISA erwägen Sie eine phosphospezifische Beschichtungsmethode oder ein kompetitionsbasiertes Format, um die Erkennung des aktivierten Rezeptors in Zell- oder Gewebslysaten sicherzustellen.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde berichtet, aber eine Validierung in Ihrem spezifischen Probenystem wird empfohlen.

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