Phospho-Histone H3-S10/T11 Kaninchen-pAk - Q16695 / P68431

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Histone H3.1t

• Histone H3.1t, auch bekannt als H3/g oder Histone H3.4, ist eine testisspezifische Histone H3-Variante, die durch das H3-4-Gen (H3FT, HIST3H3) kodiert wird.
• Es dient als Kernkomponente des Nukleosoms, wickelt DNA und verdichtet sie zu Chromatin, um die Zugänglichkeit der DNA für Transkriptions-, Replikations- und Reparaturmaschinen zu beschränken.
• Durch seine Rolle in der Chromatinstruktur ist Histone H3.1t maßgeblich an der Transkriptionsregulation, der DNA-Reparatur, der DNA-Replikation und der chromosomalen Stabilität beteiligt.
• Die Zugänglichkeit der DNA wird durch eine komplexe Reihe posttranslationaler Modifikationen (den „Histone-Code“) feinabgestimmt, wobei Histone H3.1t ein Substrat für Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung und andere Modifikationen ist.
• Das Protein lokalisiert im Zellkern und ist während des gesamten Zellzyklus mit Chromosomen assoziiert.
• Seine Expression scheint auf Hodenzellen beschränkt zu sein, was auf spezialisierte Funktionen bei der Entwicklung von Keimzellen oder der Chromatinorganisation im Hoden hindeutet.
• Laut UniProt umfassen zusätzliche Modifikationen an Histone H3.1t ADP-Ribosylierung, Citrullinierung, Hydroxylierung und Ubiquitinierung, was das vielfältige regulatorische Potenzial dieses Histons widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für den Western Blot (WB)-Nachweis von phospho-Histone H3 (Ser10/Thr11) sollten Phosphatase-Inhibitoren den Lysepuffern zugesetzt werden, um das Phosphorylierungssignal zu erhalten.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) und der Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollten die Antigen-Retrieval-Bedingungen (z. B. Citrat vs. EDTA, pH) optimiert werden, da starke Behandlungen das phosphorylierte Epitop beeinträchtigen können.
• Überprüfen Sie die Phospho-Spezifität des Antikörpers durch Behandlung von Zellextrakten mit Lambda-Phosphatase oder durch Durchführung eines Peptidwettbewerbs mit nicht-phosphorylierten und phosphorylierten Peptiden.
• Die vorhergesagte breite Speziesreaktivität deutet darauf hin, dass der Antikörper das konservierte Phosphorylierungsmotiv über eine Vielzahl von Organismen hinweg erkennen kann; jedoch wird eine Validierung im spezifischen System von Interesse empfohlen.

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