Phospho-HDAC8-S39 Kaninchen pAb - Q9BY41

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: HDAC8-Funktion und Lokalisation

• Histon-Deacetylase 8 (HDAC8) ist eine Histon-Deacetylase der Klasse I, die die Deacetylierung von Lysinresten an Core-Histonen (H2A, H2B, H3, H4) katalysiert, was zu Chromatinkompaktierung und Transkriptionsrepression führt.
  Verwandte Referenzen: PMID:10748112, PMID:10922473, PMID:10926844

• Über Histone hinaus deacetyliert HDAC8 Nicht-Histon-Proteine wie das Cohesin-Komplex-Protein SMC3 und reguliert so die Freisetzung von Cohesin aus dem Chromatin während der Zellteilung.
  Verwandte Referenzen: PMID:22885700

• HDAC8 fungiert auch als Protein-Decrotonylase, die Crotonylgruppen von Histonen entfernt und so das Spektrum der epigenetischen Modifikationen, die es reguliert, erweitert.
  Verwandte Referenzen: PMID:28497810

• Das Protein ist hauptsächlich im Zellkern und an Chromosomen lokalisiert, kann aber auch im Zytoplasma nachgewiesen werden, was auf einen dynamischen subzellulären Transport oder kontextabhängige Funktionen hindeutet.

• HDAC8 wird in den meisten Geweben schwach exprimiert, wobei höhere Expressionslevel im Herzen, Gehirn, in der Niere und der Bauchspeicheldrüse und niedrigere Level in Leber, Lunge, Plazenta und Prostata beobachtet werden.

• Die Phosphorylierung an Serin 39 (S39) ist eine wichtige regulatorische Modifikation, die die katalytische Aktivität von HDAC8, die Protein-Stabilität oder die Interaktion mit regulatorischen Partnern beeinflussen kann.

• Mutationen in HDAC8 werden mit Cornelia-de-Lange-Syndrom-Spektrumstörungen (CDLS5) in Verbindung gebracht und können zu intellektuellen Behinderungen und Adipositas-Phänotypen beitragen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für den Nachweis von phosphoryliertem HDAC8 (S39) in humanen Proben mittels Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) sollten Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle optimiert werden, um sowohl das Phospho-Epitop als auch die zelluläre Ultrastruktur zu erhalten.
• Da das Immunogen ein phospho-spezifisches Peptid ist, ist es entscheidend, die Spezifität des Antikörpers für die phosphorylierte Form zu validieren, indem Proben parallel mit einer Phosphatase behandelt oder ein nicht-phosphoryliertes Peptid als Kontrolle verwendet wird.
• Erwarten Sie eine überwiegend nukleäre Färbung mit möglichem zytoplasmatischem Signal, entsprechend der beschriebenen HDAC8-Lokalisation; schließen Sie geeignete subzelluläre Marker als Referenz ein.
• Das vorhergesagte Molekulargewicht von HDAC8 beträgt etwa 42 kDa; verifizieren Sie die Banden von Interesse gegebenenfalls durch Western-Blot auf einem separaten Gel, beachten Sie jedoch, dass die validierte Anwendung IF/ICC ist.

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