Phospho-GSK3β-S9 Kaninchen pAb - P49841

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von GSK3β

• GSK3β (Glykogen-Synthase-Kinase-3 Beta) ist eine konstitutiv aktive Serin/Threonin-Proteinkinase, die die Glykogensynthese, den Wnt-Signalweg und Transkriptionsfaktoren negativ reguliert, indem sie Zielproteine wie Glykogensynthase, Beta-Catenin und JUN phosphoryliert. Verwandte Referenzen: PMID:11430833, PMID:12554650, PMID:14690523, PMID:1846781
• Im Wnt-Signalweg bildet GSK3β einen Destruktionskomplex mit APC und AXIN1, der Beta-Catenin phosphoryliert, um es für die ubiquitinvermittelte proteasomale Degradation zu markieren. Verwandte Referenzen: PMID:12554650
• Die Phosphorylierung des mikrotubulusassoziierten Proteins TAU an Thr-548 durch GSK3β reduziert die Fähigkeit von TAU, Mikrotubuli zu stabilisieren – ein Prozess, der mit der Bildung von Neurofibrillenbündeln bei der Alzheimer-Krankheit verbunden ist. Verwandte Referenzen: PMID:14690523
• GSK3β lokalisiert sich im Zytoplasma, Zellkern und an der Zellmembran, was seine Beteiligung an mehreren Signalkaskaden ermöglicht.
• Es wird in Hoden, Thymus, Prostata und Eierstock exprimiert, mit geringerer Expression in Lunge, Gehirn und Niere; im Gehirn von Alzheimer-Patienten kolokalisiert es mit EIF2AK2/PKR und TAU.
• Die Kinase reguliert zudem den circadianen Rhythmus durch Phosphorylierung der Uhrkomponenten BMAL1 und CLOCK und moduliert die Autophagie über Acetylierung von KAT5/TIP60 unter Hungerbedingungen. Verwandte Referenzen: PMID:19946213, PMID:28903391, PMID:30704899

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches phosphoryliertes Peptid erhoben, das der Sequenz von humanem GSK3β um Ser9 entspricht; bestätigen Sie die Phosphospezifität durch Behandlung der Proben mit Lambda-Phosphatase oder einen nicht-phosphorylierten Peptid-Konkurrenztest.
• Das vorausgesagte Molekulargewicht von GSK3β beträgt etwa 47 kDa; optimieren Sie den SDS-PAGE-Gelprozentsatz und die Transferbedingungen für den Western Blot, um eine klare Bandentrennung zu erreichen.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) empfehlen wir die hitzeinduzierte Antigen-Demaskierung in Citratpuffer (pH 6,0) und eine Titrierung des primären Antikörpers, um das Signal-Rausch-Verhältnis zu maximieren.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) validieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle für Ihr Zellsystem, da GSK3β in mehreren subzellulären Kompartimenten lokalisiert sein kann.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde nachgewiesen; überprüfen Sie die Reaktivität in Geweben oder Zelllysaten Ihrer Zielart vor großangelegten Experimenten.

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