Phospho-Glucocorticoid-Rezeptor-S211 Kaninchen pAb für WB, ELISA - P04150

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Glucocorticoid-Rezeptor-Funktion und -Lokalisierung

• Der Glucocorticoid-Rezeptor (GR), kodiert durch das NR3C1-Gen, ist ein Mitglied der Kernrezeptor-Unterfamilie 3 Gruppe C Mitglied 1. Mehrere Isoformen entstehen durch alternatives Spleißen und alternative Translationsinitiation, die jeweils unterschiedliche transkriptionelle Aktivitäten und Gewebeverteilungen aufweisen.

• GR fungiert als Rezeptor für Glucocorticoide und wirkt über einen dualen Mechanismus: als Transkriptionsfaktor, der an Glucocorticoid-Antwort-Elemente (GREs) in nukleärer und mitochondrialer DNA bindet, und als Modulator anderer Transkriptionsfaktoren. Dies beeinflusst Entzündungsreaktionen, zelluläre Proliferation und Differenzierung. Verwandte Referenzen: PMID:27120390 PMID:37478846 PMID:28139699

• Er ist an der Chromatin-Remodellierung beteiligt (PubMed:9590696) und spielt eine Rolle beim schnellen mRNA-Abbau, indem er an die 5'-UTR von Ziel-mRNAs bindet und die RNA-Helikase UPF1 sowie das mRNA-Decapping-Enzym DCP1A rekrutiert, was zum RNA-Abbau führt. Verwandte Referenzen: PMID:9590696 PMID:25775514

• GR vermittelt transkriptionelle Aktivierung und Repression (PubMed:11435610, PubMed:15769988, PubMed:15866175), fördert Glucocorticoid-induzierte Apoptose (PubMed:23303127) und unterstützt eine präzise Chromosomentrennung während der Mitose, was auf eine tumorunterdrückende Rolle hindeutet. Verwandte Referenzen: PMID:11435610 PMID:15769988 PMID:15866175 PMID:23303127 PMID:25847991

• Die subzelluläre Verteilung umfasst das Zytoplasma, den Zellkern, Mitochondrien, die Spindel, das Zentrosom und Chromatin, was sein dynamisches Shuttling und seine vielfältigen Funktionsorte widerspiegelt.

• Der Rezeptor ist in Geweben wie Knochen, Magen, Lunge, Leber, Kolon, Brust, Eierstock, Bauchspeicheldrüse, Niere und Herz weit verbreitet, was seine breite physiologische Relevanz zeigt. Verwandte Referenzen: PMID:25847991 PMID:10902803

• Posttranslationale Modifikationen wie Phosphorylierung, Acetylierung, Methylierung und Ubiquitinierung regulieren die GR-Stabilität, subzelluläre Lokalisierung und transkriptionelle Aktivität. Die Phosphorylierung an Ser211, innerhalb der N-terminalen Transaktivierungsdomäne, moduliert die Rezeptorfunktion.

• Isoformen zeigen eine Bandbreite an transkriptioneller Potenz; beispielsweise fungiert Isoform Beta als dominant-negativer Inhibitor der Isoform Alpha, beeinflusst Hormonbindung und Genregulation, während andere Isoformen zum Glukosestoffwechsel und zur Insulinempfindlichkeit beitragen. Verwandte Referenzen: PMID:20484466 PMID:7769088 PMID:8621628 PMID:26711253

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Verwenden Sie Phosphatase-Inhibitoren während der Probenvorbereitung für den Western Blot, um das Phosphorylierungssignal bei Ser211 zu erhalten.
• Erwägen Sie Peptid-Blockierungs-Assays unter Verwendung des Phospho-Peptids und seines nicht-phosphorylierten Gegenstücks, um die Antikörperspezifität zu bestätigen.
• Für ELISA kann das Immunogen-Peptid als positive Kontrolle und zur Standardisierung der Beschichtungskonzentrationen dienen.
• Optimieren Sie angesichts des vorhergesagten Molekulargewichts von ~86 kDa den Polyacrylamidgel-Prozentsatz und die Elektroblotting-Bedingungen für einen effizienten Transfer hochmolekularer Proteine.
• Validieren Sie die Antikörperleistung in menschlichen oder murinen Zelllinien, die mit Glucocorticoiden (z.B. Dexamethason) stimuliert wurden, um den phosphorylierungsspezifischen Nachweis zu bestätigen.

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