Phospho-GAB1 (Tyr659) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q13480

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: GRB2-assoziiertes Bindungsprotein 1 Funktion und Lokalisierung

• GAB1 (GRB2-assoziiertes Bindungsprotein 1) ist ein Gerüst-Adapterprotein, das die Signalweiterleitung stromabwärts von multiplen Rezeptor-Tyrosinkinasen vermittelt.
• Es beteiligt sich an intrazellulären Signalkaskaden, die durch aktivierte Rezeptoren wie FGFR1, EGFR und INSR ausgelöst werden.
• Spezifisch am MET/HGF-Signalweg beteiligt. Verwandte Referenzen: PMID:29408807
• Ein Mitglied der GAB-Familie von Adaptern, die strukturelle Motive wie eine Pleckstrin-Homologie-Domäne und multiple Tyrosin-Phosphorylierungsstellen teilen, die SH2-Domänen-enthaltende Proteine rekrutieren.
• Nach Rezeptoraktivierung stark an Tyrosinresten (einschließlich Y659) phosphoryliert, was für seine Interaktion mit nachgeschalteten Effektoren entscheidend ist.
• Mutationen in GAB1 sind mit nicht-syndromaler Taubheit (DFNB26) assoziiert, was seine Rolle bei der auditorischen Funktion unterstreicht.
• Unterliegt Acetylierung und alternativem Spleißen, was seine Aktivität modulieren kann.
• 3D-Strukturinformationen sind verfügbar und geben Einblicke in seine molekulare Architektur.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid, das den Bereich um Tyr659 von humanem GAB1 entspricht. Stellen Sie sicher, dass Ihr Nachweissystem spezifisch für die phosphorylierte Form ist; ziehen Sie die Verwendung eines nicht-phosphospezifischen Antikörpers als Kontrolle in Betracht.
• Für den Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 77 kDa. Verwenden Sie einen geeigneten Gel-Prozentsatz und Transferbedingungen für Proteine in diesem Massenbereich. Validieren Sie die Bandenspezifität mit Phosphatase-behandelten Lysaten oder relevanten Inhibitoren.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; eine Optimierung der Beschichtungsbedingungen und der Antikörperkonzentration wird empfohlen. Schließen Sie phosphoryliertes Peptid als positive Kontrolle ein.
• Kreuzreaktivität wurde mit humanem und murinem GAB1 nachgewiesen. Bei der Verwendung von Mausproben sollten mögliche Hintergrundsignale durch endogene murine Immunglobuline bei Verwendung von Anti-Kaninchen-Sekundärantikörpern beachtet werden.
• Da GAB1 an multiplen Signalwegen (EGFR, INSR, MET/HGF) beteiligt ist, ziehen Sie eine geeignete Zellstimulation mit Wachstumsfaktoren (z.B. EGF, Insulin, HGF) vor der Probenvorbereitung in Betracht, um die Phosphorylierung an Tyr659 zu induzieren.
• Da es sich um einen Kaninchen-polyklonalen Antikörper handelt, sollte die Charge-zu-Charge-Konsistenz für kritische quantitative Anwendungen verifiziert werden.

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