Phospho-FOXO4-S197 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P98177

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von FOXO4

• Das Forkhead-Box-Protein O4 (FOXO4), auch bekannt als AFX, AFX1 oder MLLT7, ist ein Transkriptionsfaktor der Forkhead-Familie.
• FOXO4 bindet an Insulin-Antwortelemente (IREs) und reguliert den Insulin-Signalweg durch Aktivierung der Transkription von Zielgenen wie IGFBP1.
• Es fungiert als negativer Regulator des Zellzyklus und ist an zelluläre Differenzierung und Entwicklungsprozesse beteiligt.
• FOXO4 reguliert die HIF1A-Expression herunter und unterdrückt die hypoxieinduzierte transkriptionelle Aktivierung, was es mit Sauerstoffsignalwegen verbindet.
• In embryonalen Stammzellen erhöht FOXO4 die Proteasomaktivität durch Hochregulation von PSMD11 und fördert den Aufbau des 26S-Proteasoms.
• Das Protein ist sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern lokalisiert, wobei der nukleozytoplasmatische Shuttle durch Phosphorylierung reguliert wird.
• FOXO4 ist weit verbreitet exprimiert, mit den höchsten Gehalten in Herz, Gehirn, Plazenta, Lunge, Leber, Skelettmuskel, Niere und Bauchspeicheldrüse; die Isoform Zeta dominiert in Leber, Niere und Bauchspeicheldrüse.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung (z. B. an Ser197), Acetylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität und Stabilität modulieren.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid, das Ser197 umfasst; für phosphospezifische Detektion sollten Sie Proben mit Lambda-Phosphatase behandeln, um die Signal-Spezifität zu bestätigen.
• Für Western Blot ist eine Bande um 54 kDa zu erwarten; überprüfen Sie die Reaktion in Lysaten von Geweben mit bekannter FOXO4-Expression wie Leber oder Niere.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC überwachen Sie den nukleär-zytoplasmatischen Transport unter verschiedenen Stimuli; eine Stimulation mit Insulin oder Wachstumsfaktoren kann die Lokalisation verändern.
• Bei der Verwendung von ELISA beschichten Sie mit dem Phosphopeptid und vergleichen Sie mit nicht phosphoryliertem Peptid, um die Phospho-Selektivität des Antikörpers zu bestimmen.
• Kreuzreaktivität mit endogenem FOXO4 von Maus und Ratte ist nachgewiesen; validieren Sie die Reaktion im relevanten Spezies- und Gewebekontext.

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