Phospho-FOXO1-S319 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q12778

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von FOXO1

• FOXO1 ist ein Transkriptionsfaktor und das Hauptziel des Insulin-Signalwegs, der die metabolische Homöostase als Reaktion auf oxidativen Stress reguliert. Zugehörige Referenzen: PMID:10358076 PMID:12228231 PMID:15220471
• Es bindet an Insulin-Antwortelemente (IRE) und Daf-16-Familien-Bindungselemente (DBE), wobei seine Aktivität durch Insulin unterdrückt wird. Zugehörige Referenzen: PMID:10358076
• FOXO1 pendelt zwischen Zytoplasma und Zellkern, und seine subzelluläre Lokalisierung wird durch posttranslationale Modifikationen reguliert – einschließlich der Phosphorylierung an Stellen wie Ser319.
• In Hepatozyten fördert es die Glukoneogenese durch direkte Aktivierung der Expression von PPARGC1A und G6PC1. Zugehörige Referenzen: PMID:17024043
• FOXO1 ist ein wichtiger Regulator des Zelltods, wirkt downstream von CDK1, PKB/AKT1 und STK4/MST1 und fördert den Tod von Nervenzellen. Zugehörige Referenzen: PMID:18356527 PMID:19221179
• Es wird für die Induktion des autophagen Zelltods als Reaktion auf Hunger oder oxidativen Stress benötigt, auf transkriptionsunabhängige Weise. Zugehörige Referenzen: PMID:20543840
• FOXO1 reguliert die Apoptose in glatten Herzmuskelzellen positiv und steuert die Lebensfähigkeit und Apoptose von Endothelzellen über PPIA/CYPA-abhängige Transkription. Zugehörige Referenzen: PMID:19483080 PMID:31063815
• Gewebeexpression: reichlich exprimiert in Skelettmuskulatur und Eierstock, mit niedrigeren Spiegeln in Herz, Leber und anderen Geweben; auf Proteinebene in Nabelendothelzellen exprimiert. Zugehörige Referenzen: PMID:9479491 PMID:19483080

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches phosphoryliertes Peptid erhoben, das den Resten um Ser319 von humanem FOXO1 entspricht. Für den Nachweis der Phosphorylierung an dieser Stelle empfehlen sich Phosphatase-Inhibitoren in Lysepuffern, um das Phospho-Epitop zu erhalten.
• Im Western Blot kann eine Bande beobachtet werden, die dem vorausgesagten Molekulargewicht von FOXO1 (~70 kDa) entspricht. Wir empfehlen die Validierung in Ihrem experimentellen System mit geeigneten Positiv- und Negativkontrollen.
• Für die Immunhistochemie (Paraffin) sollten Antigen-Retrieval-Methoden und Antikörper-Titrierung für den jeweiligen Gewebetyp und die Fixierungsbedingungen optimiert werden.
• Aufgrund der Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte kann dieser Antikörper ein nützliches Werkzeug für vergleichende Studien zwischen diesen Spezies sein; dennoch wird eine Sequenzabgleich der Immunogenregion empfohlen, um die Konservierung des Epitops zu bestätigen.

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