Phospho-Filamin A-S2152 Kaninchen pAb für WB, ELISA - P21333

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Filamin-A-Funktion und -Lokalisation

• Filamin-A (FLNA) ist ein wichtiges Aktin-bindendes Protein, das Aktinfilamente zu orthogonalen Netzwerken vernetzt und an Membranglykoproteine koppelt. Es dient als Gerüst für eine Vielzahl zytoplasmatischer Signalproteine.
• Es lokalisiert in der Zellrinde, dem Zytoskelett, dem Perikaryon und spezialisierten Zellfortsätzen wie Wachstumskegeln und Podosomen, wo es das Aktinzytoskelett organisiert.
• Filamin-A ist essenziell für die Zelladhäsion, Zell-Zell-Kontakte und die Dynamik von Adhärenzverbindungen während der Entwicklung von Blutgefäßen, Herz und Gehirn.
• Es wird für den SEMA3A-induzierten Kollaps des Wachstumskegels während der Axonführung benötigt und verbindet so die Semaphorin-Signalübertragung mit dem Aktin-Remodeling. Verwandte Referenzen: PMID:25358863
• Filamin-A wird ubiquitär exprimiert und hat ein Molekulargewicht von ~281 kDa. Mehrere Isoformen entstehen durch alternatives Spleißen, wobei dieses Produkt auf eine in der kanonischen Sequenz konservierte Phosphorylierungsstelle abzielt.
• Das Protein unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung, Isopeptidbindungsbildung und Ubiquitin-Konjugation. Die Phosphorylierung an S2152 ist ein dynamisch reguliertes Ereignis.
• Mutationen in FLNA sind mit einem Spektrum menschlicher Krankheiten assoziiert, darunter periventrikuläre noduläre Heterotopie, otopalatodigitale Syndrome und kardiale valvuläre Dysplasie.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da das Immunogen ein synthetisches Phosphopeptid um S2152 ist, sollten während der Probenvorbereitung für den Western Blot Phosphatase-Inhibitoren zugesetzt werden, um den Phosphorylierungszustand zu erhalten.
• Überprüfen Sie die Antikörperspezifität durch Kompetition mit dem nicht-phosphorylierten Peptid oder durch Behandlung der Proben mit Lambda-Phosphatase. Ein Signalverlust bestätigt die Phospho-Spezifität.
• Die große Größe von Filamin-A (281 kDa) kann SDS-PAGE-Gele mit niedrigem Prozentgehalt (z. B. 6%) und verlängerte Transferzeiten erfordern. Erwägen Sie einen Nass-Transfer bei 30 V über Nacht.
• Für ELISA kann die Kombination dieses phosphospezifischen Antikörpers mit einem Gesamt-Filamin-A-Antikörper erwogen werden, um Phospho/Gesamt-Verhältnismessungen zu ermöglichen.
• Kreuzreaktivität wird für Human, Maus und Ratte berichtet. Validieren Sie dies in Ihrem spezifischen Gewebe- oder Zellsystem, wenn Sie mit anderen Spezies arbeiten.

CamelBio: Ihre One-Stop-Beschaffungsbrücke

CamelBio bietet Diagnostikherstellern, Laboren und Forschungsinstituten einen optimierten Zugang zu hochwertigen IVD-Rohmaterialien, einschließlich validierter Antikörperpaare, optimierter monoklonaler/polyklonaler Antikörper und Bulk-Hilfsreagenzien. Für Forschungsbereiche wie Aktinzytoskelett-Dynamik, Zellsignalübertragung und Filamin A-assoziierte Erkrankungen bieten wir auch die Beschaffung seltener Ziel-Rohmaterialien und technische Beratung an, um Ihr Projekt von der Konzeption bis zur Klinik zu unterstützen. Kontaktieren Sie uns, um zu besprechen, wie wir dieses Produkt oder maßgeschneiderte Alternativen für Ihre Entwicklungsbedürfnisse liefern können.