Phospho-FGFR3-Y724 Kaninchen-pAk - P22607

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: FGFR3-Funktion und -Lokalisierung

• Vom FGFR3-Gen (auch bekannt als JTK4) kodiert, ist der Fibroblasten-Wachstumsfaktor-Rezeptor 3 eine transmembrane Tyrosinkinase, die als Zelloberflächenrezeptor für Fibroblasten-Wachstumsfaktoren dient.
• Spielt eine kritische Rolle bei der Regulation der Chondrozyten-Differenzierung, -Proliferation und -Apoptose und ist für die normale Skelettentwicklung und die postnatale Knochenmineralisierung unerlässlich.
• Die Ligandenbindung aktiviert mehrere abwärtsgerichtete Signalwege, einschließlich PLCG1, was zur Produktion von DAG und IP3 führt, sowie FRS2-vermittelte Rekrutierung von GRB2, GAB1, PIK3R1 und SOS1, was zur Aktivierung der RAS-MAPK- und AKT1-Signalwege führt.
• Mutationen, die eine konstitutive Kinaseaktivierung oder eine beeinträchtigte Rezeptorreifung, Internalisierung und Degradation verursachen, führen zu aberranter Signalgebung und sind mit Skelettdysplasien und Krebs assoziiert; die sezernierte Isoform 3 kann die FGF-Signalgebung stören.
• Zur subzellulären Lokalisierung gehören die Zellmembran, zytoplasmatische Vesikel, das endoplasmatische Retikulum und eine sezernierte Form; Expression wird in Gehirn, Niere und Hoden nachgewiesen, mit hoher fetaler Expression in Niere, Lunge, Dünndarm und Gehirn.
• Isoform 2 wird vorwiegend in Epithelzellen nachgewiesen, während Isoform 1 und 2 in fibroblastischen Zellen gefunden werden; das Protein unterliegt alternatives Spleißen und N-verknüpfter Glykosylierung.
• Als Phosphoprotein und Rezeptor-Tyrosinkinase klassifiziert, ist FGFR3 an Krankheiten beteiligt, einschließlich Kraniosynostose, Taubheit, Zwergwuchs und ektodermale Dysplasie.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blotting beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ca. 88 kDa; erwägen Sie die Verwendung eines geeigneten Gel-Prozentsatzes (z. B. 8–10 % SDS-PAGE) und optimieren Sie die Transferbedingungen. Validieren Sie die Nachweisbarkeit in Ihrem Probensystem, da posttranslationale Modifikationen und Isoformen zu Mobilitätsverschiebungen führen können.
• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid, das Tyr724 von menschlichem FGFR3 entspricht; um die Phosphorylierungsspezifität zu bestätigen, fügen Sie eine Behandlung mit Lambda-Phosphatase hinzu oder verwenden Sie eine nicht-phosphorylierte Peptid-Blockierungskontrolle im ELISA.
• Dieser Antikörper kreuzreagiert mit menschlichem und murinem FGFR3; überprüfen Sie die Reaktivität in anderen Spezies vor der Verwendung.
• Für ELISA optimieren Sie die Beschichtungskonzentration des Antigens und die Antikörperverdünnung unter Verwendung des phosphorylierten Peptids als Positivkontrolle. Erwägen Sie ein Standard-Indirekt-ELISA-Protokoll.

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