Phospho-FAK-Y576/577 Kaninchen-poliklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q05397

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: FAK-Funktion und Lokalisierung

• Fokale Adhäsionskinase 1 (FAK, PTK2) ist eine nicht-Rezeptor-Protein-Tyrosinkinase, die Zellmigration, Adhäsion, Ausbreitung und Reorganisation des Aktin-Zytoskeletts reguliert.
• FAK spielt eine wesentliche Rolle bei der Embryonalentwicklung, Angiogenese, Kardiomyozytenmigration und Entwicklung des Nervensystems.
• Die vollständige Isoform 1 vermittelt die Signalgebung von Integrinen, Wachstumsfaktorrezeptoren und GPCRs und aktiviert PI3K/AKT- und MAPK-Signalwege.
• Isoform 6 (FRNK) fehlt die Kinasedomäne und wirkt als dominant-negativer Inhibitor der FAK-Phosphorylierung und Signalgebung.
• FAK ist an fokalen Adhäsionen, Zellmembran, Zytoplasma, Zentrosomen und Zellkern lokalisiert, was auf dynamisches Shuttling hinweist.
• Die Phosphorylierung an Tyr576 und Tyr577 in der Aktivierungsschleife der Kinasedomäne ist entscheidend für die katalytische Aktivität von FAK.
• FAK phosphoryliert nachgeschaltete Substrate wie NEDD9 (PubMed:9360983) und SRC, um die Bildung von Signalkomplexen zu fördern. Verwandte Referenzen: PMID:9360983
• Allgegenwärtige Expression; nachgewiesen in B/T-Lymphozyten, Lungenfibroblasten und Epithelzellen (PubMed:31630787). Verwandte Referenzen: PMID:31630787

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid, das Tyr576/Tyr577 umfasst; die Antikörperspezifität hängt vom Phosphorylierungszustand ab.
• Fügen Sie Phosphatase-Inhibitoren zu Lysepuffern hinzu, um Phospho-Epitope während der Probenvorbereitung zu erhalten.
• Für Western Blot ist eine Hauptbande bei ~119 kDa zu erwarten; zusätzliche Banden können Abbau oder Kreuzreaktivität darstellen.
• Validieren Sie die Detektion in aktivierten Zelllinien (z. B. Integrin-stimulierten Fibroblasten), in denen die FAK-Y576/577-Phosphorylierung induziert wird.
• Für ELISA erwägen Sie die Beschichtung mit dem Phosphopeptid-Immunogen oder die Verwendung von Ganzzelllysaten; fügen Sie nicht-phosphoryliertes Peptid als Negativkontrolle hinzu.

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