Phospho-FAK-Y397 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, ELISA - Q05397

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von FAK

• Fokale Adhäsionskinase 1 (FAK, auch bekannt als PTK2) ist eine Nicht-Rezeptor-Protein-Tyrosinkinase, die eine zentrale Rolle bei der Integrin-vermittelten Signaltransduktion spielt und Zellmigration, Adhäsion, Ausbreitung und zytoskelettale Reorganisation reguliert.
• FAK wird vom PTK2-Gen kodiert und ist unerlässlich für die frühe Embryonalentwicklung, Angiogenese, Kardiomyozytenfunktion und Entwicklung des Nervensystems (Axonenwachstum, neuronale Migration, Synapsenbildung).
• FAK erfährt nach Aktivierung Autophosphorylierung an Tyr397, wodurch eine hochaffine Bindestelle für Kinasen der SRC-Familie entsteht; dieses Ereignis ist entscheidend für die Assemblierung von Signalkomplexen, die nachgeschaltete Signalwege wie PI3K/AKT und MAPK/ERK weiterleiten.
• Subzellulär lokalisiert sich FAK überwiegend an fokalen Adhäsionen, aber auch an der Zellmembran, im perinukleären Zytoplasma, Zellkortex, Zytoskelett, Zentrosom, Ziliengrundkörper und im Zellkern, was seine vielfältigen Signalfunktionen widerspiegelt.
• Isoform 6 (FRNK) fehlt die Kinasedomäne und wirkt als dominant-negativer Inhibitor der FAK-Signalgebung, indem sie die nukleäre Akkumulation von LPXN abschwächt und die SRF-abhängige Gentranskription begrenzt.
• FAK ist weit verbreitet exprimiert; es wird ubiquitär und besonders in Epithelzellen, B- und T-Lymphozyten sowie Lungenfibroblasten nachgewiesen. Verwandte Referenzen: PMID:31630787
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen Tyrosinphosphorylierung (z. B. Y397), Acetylierung und Ubiquitinierung, die seine Kinaseaktivität, Proteininteraktionen und Stabilität regulieren.
• Dieser Antikörper erkennt spezifisch FAK, das an Tyr397 phosphoryliert ist, sodass Forschende den FAK-Aktivierungsstatus in Signaluntersuchungen überwachen können.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um Tyr397; der Antikörper soll spezifisch die phosphorylierte Form erkennen. Validieren Sie die Spezifität durch Behandlung von Lysaten mit Phosphatase oder durch Blockierung mit nicht phosphoryliertem Peptid.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~119 kDa. Verwenden Sie geeignete Positivkontrollen (z. B. mit Pervanadat behandelte Zellen, um Phosphorylierung zu induzieren).
• Für ELISA sollten Sie Platten mit dem Phosphopeptid beschichten und einen totalen FAK-Antikörper als Ladungskontrolle verwenden.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ist angegeben, aber führen Sie Titrationsexperimente im jeweiligen Modellsystem durch.
• Versand erfolgt mit Eisbeuteln; lagern Sie nach Erhalt bei -20°C für langfristige Stabilität.

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