Phospho-FAK-Y397 Kaninchen mAb für WB und ELISA - Q05397

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: FAK-Funktion und Lokalisation

• FAK (Fokaladhäsionskinase 1) ist eine nicht-Rezeptor-Protein-Tyrosinkinase, die vom PTK2-Gen kodiert wird und auch als p125FAK oder pp125FAK bezeichnet wird. Sie fungiert als zentraler Vermittler der Integrin-Signalübertragung und reguliert Zelladhäsion, Migration, Proliferation und Überleben.
• Nach der Aktivierung an fokalen Adhäsionen autophosphoryliert FAK an Tyrosin 397, wodurch eine hochaffine Bindestelle für SRC-Familienkinasen entsteht und nachgeschaltete Signalkaskaden initiiert werden, die für die cytoskeletale Umgestaltung entscheidend sind.
• FAK integriert Signale von verschiedenen Rezeptoren, darunter Integrine, Wachstumsfaktorrezeptoren, GPCRs, EPHA2 und Netrin-Rezeptoren, und koppelt sie an Pfade wie PI3K/AKT und MAPK/ERK, die Zellwachstum und Differenzierung steuern.
• Durch lokalisierte Modulation von GTPasen der Rho-Familie über GEFs und GAPs orchestriert FAK die Reorganisation des Aktin-Zytoskeletts, Zellausbreitung und die Bildung von Zellvorsprüngen.
• FAK phosphoryliert NEDD9 (HEF1) direkt nach Integrinbindung und trägt so zur Assemblierung nachgeschalteter Signalkomplexe bei. Verwandte Referenzen: PMID:9360983
• Die nicht-katalytische Isoform 6 (FRNK) wirkt als dominant-negativer Inhibitor der FAK-Signalübertragung und schwächt die nukleäre LPXN-Akkumulation und die Serum-Response-Faktor-abhängige Transkription ab.
• Subzellulär lokalisiert sich FAK dynamisch an fokalen Adhäsionen, der Zellkortikalis, perinukleärem Zytoplasma, Zentrosomen und im Kern, was seine vielfältigen Rollen bei der Signaltransduktion und strukturellen Organisation widerspiegelt.
• Posttranslationelle Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung an mehreren Tyrosinen, Serinen und Threoninen sowie Acetylierung und Ubiquitinierung, regulieren FAK-Aktivität, Stabilität und Proteininteraktionen streng.
• FAK ist ubiquitär exprimiert mit Anreicherung in Epithelzellen, Lymphozyten und Lungenfibroblasten und ist unverzichtbar für die embryonale Entwicklung, Angiogenese und Reifung des Nervensystems.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen zielt auf die phosphorylierte Y397-Reste ab; um die Phosphospezifität im WB zu bestätigen, empfehlen sich eine Behandlung der Proben mit Lambda-Phosphatase oder eine Inkubation des Antikörpers mit einem nicht-phosphorylierten Blockierungspeptid.
• Für ELISA-Anwendungen kann die Verwendung des phosphorylierten Peptids als Positivkontrolle und seines nicht-phosphorylierten Gegenstücks als Negativkontrolle helfen, die Signal-spezifität zu validieren.
• FAK wandert bei SDS-PAGE bei etwa 119 kDa; stellen Sie sicher, dass der Gelprozentsatz und die Transferzeit für Blots mit hohem Molekulargewicht geeignet sind.
• Dieser Antikörper wurde gegen die humane FAK-Sequenz hergestellt; Kreuzreaktivität mit anderen Spezies wurde nicht umfangreich getestet. Validieren Sie die Reaktivität in Ihrem spezifischen Modellsystem, wenn Sie ihn außerhalb von humanen Proben verwenden.

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