Phospho-Ezrin-T567 Kaninchen pAb für WB - P15311

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Ezrin

• Ezrin (auch bekannt als Cytovillin, Villin-2, p81) ist ein ~69 kDa großes zytoskelettales Linkerprotein, das vom EZR (VIL2)-Gen kodiert wird.
• Es fungiert als entscheidender Verbinder zwischen der Plasmamembran und dem Aktin-Zytoskelett und spielt eine wesentliche Rolle bei der Bildung von epithelialen Mikrovilli und Membranruffeln an der apikalen Zelloberfläche.
• Gemeinsam mit dem Guanin-Nukleotid-Austauschfaktor PLEKHG6 wird Ezrin für die normale Makropinozytose benötigt, einem Prozess der nicht-selektiven flüssigphasen Endozytose.
• Subzellulär lokalisiert Ezrin an der apikalen Zellmembran, an Mikrovillus- und Ruffelmembranen sowie an der Zellkortex und dem Zytoskelett – was seine dynamische Rolle bei der Membran-Zytoskelett-Remodellierung widerspiegelt.
• Die Gewebeexpression ist besonders ausgeprägt in den Mikrovilli intestinaler Epithelzellen und bevorzugt in Astrozyten des Hippocampus, des Frontalkortex und anderer Gehirnregionen; in Neuronen ist sie in den meisten untersuchten Geweben schwach exprimiert oder fehlt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung (ein Kennzeichen seiner Aktivierung), Acetylierung und S-Nitrosylierung, die alle zu seiner regulatorischen Vielseitigkeit bei zellulären Prozessen wie Erhaltung der Zellform, Adhäsion und Signalgebung beitragen.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Da dieser Antikörper phosphospezifisch ist (T567), stellen Sie eine vollständige Hemmung von Phosphatasen während der Zell-/Gewebslyse sicher (z. B. durch Verwendung von Phosphatase-Inhibitor-Cocktails), um das Phosphorylierungssignal zu erhalten.
• Für Western Blot ist eine Bande bei etwa 69 kDa zu erwarten; verwenden Sie eine Positivkontrolle wie pervanadat-behandelte Zellen, um die Phosphospezifität zu überprüfen.
• Um die Phospho-Abhängigkeit des Signals zu bestätigen, behandeln Sie Proben mit Lambda-Proteinphosphatase oder führen Sie Peptid-Konkurrenzassays mit dem nicht phosphorylierten Immunogenpeptid durch.
• Obwohl der Antikörper für humane Proben optimiert ist, deutet die nachgewiesene Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte auf eine hohe Sequenzkonservierung hin; validieren Sie den Antikörper in Ihrem spezifischen Modellsystem mit geeigneten Kontrollen.
• Dieser Antikörper wird nur für Western Blot (WB) empfohlen; seine Leistung in anderen Anwendungen (z. B. IHC, IF, IP) wurde nicht bewertet und erfordert eine weitere Validierung.

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