Phospho-ERK3-S189 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q16659

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Mitogen-aktivierte Proteinkinase 6 Funktion und Lokalisation

• Die mitogen-aktivierte Proteinkinase 6 (MAPK6), auch bekannt als extrazellulär signal-regulierte Kinase 3 (ERK-3) oder p97-MAPK, ist eine atypische MAPK, die durch das MAPK6-Gen kodiert wird.
• MAPK6 fehlt das typische TXY-Aktivierungsmotiv und zeigt eine geringe basale Kinaseaktivität; sie phosphoryliert Substrate wie mikrotubuli-assoziiertes Protein 2 (MAP2) und MAPK-aktivierte Proteinkinase 5 (MAPKAPK5).
• Die Kinase bildet einen Komplex mit MAPKAPK5, wobei ERK3/MAPK6 zuerst an Ser-189 phosphoryliert wird, was dann die Phosphorylierung und Aktivierung von MAPKAPK5 vermittelt; MAPKAPK5 phosphoryliert im Gegenzug ERK3/MAPK6 in einer regulatorischen Rückkopplungsschleife (By similarity).
• Könnte eine Rolle bei der Förderung des Zellzykluseintritts spielen, obwohl die genaue biologische Funktion noch untersucht wird (By similarity).
• Subzellulär lokalisiert MAPK6 sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern, was zu ihrer Beteiligung an Signalwegen passt, die extrazelluläre Reize weiterleiten.
• Die Gewebeexpression ist am höchsten in Skelettmuskel und Gehirn, mit zusätzlichem Vorkommen in Herz, Plazenta, Lunge, Leber, Bauchspeicheldrüse, Niere und Hautfibroblasten.
• Schlüsselwörter von UniProt heben ihre Klassifizierung als Serin/Threonin-Proteinkinase, Nukleotidbindung, ATP-Bindung, Phosphoprotein und ihre Beteiligung am Zellzyklus hervor.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Als phospho-spezifischer Antikörper gegen an Ser-189 phosphoryliertes ERK3 ist es entscheidend, während der Probenvorbereitung geeignete Phosphataseinhibitoren zu verwenden, um das Phosphorylierungssignal zu erhalten.
• Für Western Blot (WB) sollten Sie eine Phosphatase-behandelte Kontrolle oder einen Sperrversuch mit einem nicht-phosphorylierten Peptid in Betracht ziehen, um die Phospho-Spezifität zu bestätigen.
• Der Antikörper reagiert mit humanem, murinem und Rattus-ERK3; validieren Sie die Detektion in den relevanten Zell- oder Gewebelysaten, in denen ERK3 exprimiert wird (z.B. Skelettmuskel, Gehirn).
• Für ELISA verwenden Sie ein phosphoryliertes Peptid, das dem Immunogen entspricht, als positive Kontrolle und ein nicht-phosphoryliertes Peptid als Spezifitätskontrolle.
• Beachten Sie, dass das vorhergesagte Proteingewicht etwa 83 kDa beträgt; das beobachtete Bandenmuster kann jedoch je nach posttranslationalen Modifikationen oder Gelbedingungen leicht variieren.

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