Phospho-ERK1 (T202/Y204) + ERK2 (T185/Y187) Rabbit mAb für WB, IHC-P, ELISA - P27361/P28482

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: ERK1/2 Funktion und Lokalisierung

• Die Mitogen-aktivierte Proteinkinase 3 (MAPK3/ERK1) ist eine Serin/Threonin-Kinase, die als wesentliche Komponente des MAP-Kinase-Signaltransduktionsweges fungiert und diverse biologische Funktionen wie Zellwachstum, Adhäsion, Überleben und Differenzierung vermittelt. Verwandte Referenzen: PMID:34497368
• ERK1 phosphoryliert über 160 bekannte Substrate, die im Kern (z. B. Transkriptionsfaktoren ATF2, ELK1, FOS) und im Zytosol (z. B. zytoskelettale Elemente, Regulatoren der Apoptose und Translation) lokalisiert sind, was eine breite Kontrolle über Transkription, Translation und Apoptose ermöglicht. Verwandte Referenzen: PMID:35216969
• In ruhenden Zellen ist ERK1 überwiegend zytoplasmatisch, wandert aber nach Stimulation in den Kern. Er lokalisiert sich auch in Membranhöhlen (Caveolae), Zellkontakten und Fokaladhäsionen, was seine Rolle bei der Signalintegration und Zytoskelett-Reorganisation unterstreicht.
• Die MAPK/ERK-Kaskade, einschließlich ERK1, ist an der Regulation der Endosomdynamik, der Lysosomenverarbeitung, des Endosomzyklus durch das perinukleäre Recycling-Kompartiment (PNRC) und der Fragmentation des Golgi-Apparats während der Mitose beteiligt.
• ERK1 unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung (Thr-202/Tyr-204), Acetylierung und Ubiquitinierung, und ist an der Kontrolle des Zellzyklus, Wirt-Virus-Interaktionen und der Apoptose beteiligt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Basierend auf dem synthetischen Phosphopeptid-Immunogen um T202/Y204 von humanem ERK1 ist dieser Antikörper darauf ausgelegt, die aktive, doppelphosphorylierte Form von ERK1 zu erkennen und kreuzreagiert aufgrund der hohen Sequenzhomologie mit den entsprechenden phosphorylierten Stellen (T185/Y187) in ERK2. Verwenden Sie während der Probenvorbereitung Phosphatase-Inhibitoren, um die Phosphorylierung zu erhalten.
• Für den Western Blot ist ein Band bei ~42–44 kDa zu erwarten. Um die Integrität des Phospho-Signals zu erhalten, verwenden Sie milde Stripping-Puffer oder bereiten Sie frische Proben für wiederholtes Sondieren vor, anstatt hartes Stripping anzuwenden.
• Bei IHC-P kann eine Standard-Antigen-Retrieval (z. B. Citratpuffer, pH 6,0) angewendet werden. Fügen Sie sowohl stimulierte als auch unstimulierte Gewebekontrollen hinzu, um die Phospho-Spezifität zu bestätigen.
• Für ELISA kann ein Sandwich-Format unter Verwendung eines pan-ERK-Fangantikörpers, gepaart mit diesem Detektionsantikörper, verwendet werden, um aktives ERK1/2 in Lysaten oder Homogenaten zu quantifizieren.

CamelBio: Ihre One-Stop-Sourcing-Brücke

CamelBio bietet Diagnostika-Herstellern, CROs und Forschungsinstituten ein umfassendes Portfolio an IVD-gradigen Antikörpern, einschließlich phospho-spezifischer Klone für den MAPK/ERK-Weg. Unser One-Stop-Sourcing-Modell umfasst Rohstoffe für seltene Ziele, validierte Antikörperpaare und technische Beratung, um die Assay-Entwicklung vom Konzept bis zur Klinik zu beschleunigen.