Phospho-ERK1-T202 + ERK2-T185 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P28482 / P27361

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ERK1/ERK2

• ERK2 (MAPK1, auch bekannt als p42-MAPK) und ERK1 (MAPK3, p44-MAPK) sind die beiden wichtigsten mitogenaktivierten Proteinkinasen, die den Kern der MAPK/ERK-Signalkaskade bilden und extrazelluläre Signale zur Regulation des Zellschicksals weiterleiten.
• Der MAPK/ERK-Weg steuert ein breites Spektrum zellulärer Prozesse einschließlich Proliferation, Differenzierung, Adhäsion, Überleben und Apoptose, indem er über 160 nachgeschaltete Substrate phosphoryliert – darunter Transkriptionsfaktoren (z. B. ELK1, FOS, ATF2), Proteinkinasen (z. B. RSK, MSK, MNK) und Regulationsproteine des Zytoskeletts.
• Nach Aktivierung phosphoryliert ERK1/2 GLI1, um dessen Dissoziation von SUFU und nukleäre Translokation zu fördern, und moduliert dadurch den Smoothened-Signalweg positiv.
  Verwandte Referenzen: PMID:35831023
• Als Antwort auf Hypoxie phosphoryliert ERK2 die Phosphoglyceratkinase PGK1 und lenkt sie zur Mitochondrie, um die Acetyl-CoA-Produktion aus Pyruvat zu unterdrücken.
  Verwandte Referenzen: PMID:26942675
• Die Kinase ist in mehreren subzellulären Kompartimenten lokalisiert: Zytoplasma, Zellkern, Zytoskelett (Spindel, Zentrosom), Fokale Adhäsionen und Membran-Caveolae, was kontextabhängige Signalübertragung ermöglicht.
• Aktivierung erfordert die doppelte Phosphorylierung am Thr-Glu-Tyr-Motiv (T185 und Y187 in ERK2; T202 und Y204 in ERK1) durch vorgeschaltete MEK-Kinasen; dieser Antikörper detektiert spezifisch das phosphorylierte T185 (ERK2) und T202 (ERK1).
• Über die Kinaseaktivität hinaus fungiert ERK2 auch als Transkriptionsrepressor, indem es unabhängig von seiner katalytischen Aktivität an GC-reiche Promotorelemente bindet und interferon-responsive Gene moduliert.
• Schlüsselwörter: Acetylierung, Alternatives Spleißen, Apoptose, ATP-Bindung, Zellzyklus, Zellverbindung, Zytoplasma, Zytoskelett, DNA-Bindung, Wirt-Virus-Interaktion, Kinase, Membran, Nukleotidbindung, Zellkern, Phosphoprotein, Repressor, Serin/Threonin-Proteinkinase, Transkription, Transkriptionsregulation, Ubl-Konjugation.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Um die Phosphorylierung während der Probenvorbereitung zu erhalten, fügen Sie Ihren Lysepuffern Phosphatase-Inhibitoren hinzu und vermeiden Sie längere Probenhandhabung bei Raumtemperatur.
• Validieren Sie die Antikörperspezifität durch Behandlung von Zelllysaten mit Lambda-Proteinphosphatase; im Western Blot erwarten Sie einen vollständigen Verlust des Signals.
• Bei IHC-P optimieren Sie die Bedingungen zur Antigen-Retrieval (z. B. Citratpuffer pH 6,0) und erwägen Sie die Verwendung eines phosphospezifischen Signalverstärkungsprotokolls, um die Detektion niedrig abundanter phosphorylierter Targets zu verbessern.
• Für IF/ICC fixieren Sie Zellen mit Formaldehyd und permeabilisieren Sie mit Methanol; bestätigen Sie die Kolokalisierung mit bekannten subzellulären Markern (z. B. nukleäres DAPI, Golgi-Marker) entsprechend der erwarteten Lokalisation nach Stimulation.
• Erwartete Banden: ~38–43 kDa für ERK1/ERK2-Isoformen; aufgrund unterschiedlicher Phosphorylierungsstatus oder Spleißvarianten können mehrere Banden auftreten.

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