Phospho-ErbB4/HER4-Y1284 Kaninchen-pAk - mAb

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ErbB4/HER4-Funktion und -Lokalisierung

• ErbB4 (HER4) ist eine Rezeptor-Tyrosin-Proteinkinase, die als Zelloberflächenrezeptor für Neureguline und Liganden der EGF-Familie dient und eine kritische Rolle bei der Entwicklung von Herz, ZNS und Milchdrüse spielt.
• Das Gen kodiert durch alternatives Spleißen mehrere Isoformen (JM-A, JM-B, CYT-1, CYT-2), die sich in Ligandenspezifität, Signalfähigkeit und proteolytischer Verarbeitung unterscheiden.
• Die Ligandenbindung induziert Rezeptordimerisierung und Autophosphorylierung an spezifischen Tyrosinen, einschließlich Y1284, wodurch Andockstellen für Adaptorproteine entstehen, um Downstream-Signalwege wie MAPK und PI3K-AKT zu aktivieren.
• Isoformen, die die CYT-1-Domäne enthalten (JM-A CYT-1, JM-B CYT-1), schützen vor Apoptose und fördern die Zellmigration über PI3K/AKT, während CYT-2-Isoformen diese Aktivität nicht aufweisen.
• Die proteolytische Spaltung von JM-A-Isoformen setzt eine lösliche intrazelluläre Domäne (4ICD) frei, die in den Kern transloziert, um die Transkription zu regulieren (z. B. Milchproteingene über STAT5A), oder in die Mitochondrien, um Apoptose zu induzieren.
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst die Zellmembran, den Kern und das Mitochondrium, was die vielfältigen Signalrollen widerspiegelt.
• ErbB4 ist stark in Gehirn, Herz, Niere und Milchdrüse exprimiert, mit isoformspezifischen Mustern; beispielsweise überwiegen JM-B-Isoformen im Herzen.
• Es ist an Differenzierung, Proliferation und Apoptose beteiligt und wird bei Mutationen mit Krankheiten wie Amyotropher Lateralsklerose in Verbindung gebracht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um Tyrosin 1284, sodass der Antikörper spezifisch phosphoryliertes ErbB4 an dieser Stelle erkennt. Für den WB sollten Sie während der Lyse Phosphatase-Inhibitoren verwenden, um den Phosphorylierungsstatus zu erhalten.
• Da die Anwendungen WB und ELISA umfassen, überprüfen Sie die Spezifität durch Tests mit nicht-phosphoryliertem Peptid-Wettbewerb oder durch Behandlung der Proben mit Phosphatasen, um einen Signalverlust zu bestätigen.
• ErbB4 wird in mehreren Geweben exprimiert; validieren Sie in einem relevanten Probenystem (z. B. Herz- oder Hirnlysate für endogene Nachweise oder überexprimierte Modelle für Zellen mit niedriger Expression).

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