Phospho-eIF2α-S49 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P - P05198

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von eIF2α (EIF2S1)

• EIF2S1 kodiert die Alpha-Untereinheit des eukaryotischen Translationsinitiationsfaktors 2 (eIF2), einem Heterotrimer, der das Initiator-Met-tRNAi an die 40S-ribosomale Untereinheit liefert. Verwandte Referenzen: PMID:16289705
• eIF2 bildet zusammen mit GTP und Met-tRNAi einen ternären Komplex, der an die 40S-Untereinheit bindet, um den 43S-Präinitiationskomplex zu erzeugen; die anschließende mRNA-Rekrutierung führt nach GTP-Hydrolyse zur Bildung des 80S-Komplexes. Verwandte Referenzen: PMID:16289705
• Um eIF2 zu reaktivieren, muss das GDP durch den Guanin-Nukleotid-Austauschfaktor eIF2B gegen GTP ausgetauscht werden. Verwandte Referenzen: PMID:16289705
• Phosphorylierung an Ser49 (und anderen Serinresten) durch stresssensible Kinasen (EIF2AK1/HRI, EIF2AK2/PKR, EIF2AK3/PERK, EIF2AK4/GCN2) wandelt eIF2α in einen globalen Translationsinhibitor um, dämpft die cap-abhängige Proteinsynthese und begünstigt die Translation von stressresponsiven mRNAs wie ATF4 und QRICH1. Verwandte Referenzen: PMID:19131336 PMID:33384352 PMID:38340717
• eIF2α nimmt auch an der Mitophagie teil: Bei mitochondrialer Schädigung relokalisiert Phospho-eIF2α an die mitochondriale Oberfläche, um eine PRKN-unabhängige Mitophagie zu fördern. Verwandte Referenzen: PMID:38340717
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst das Zytoplasma, das Cytosol, Stressgranula und Mitochondrien.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und umfangreiche Phosphorylierung; eIF2α bindet RNA und wird als Initiationsfaktor, Phosphoprotein und Mitglied des Referenzproteoms klassifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein phosphospezifisches Peptid, das den Resten um Ser49 von humanem EIF2S1 entspricht. Um die Phosphorylierung zu erhalten, fügen Sie Phosphatase-Inhibitoren den Lysepuffern hinzu und arbeiten Sie schnell.
• Für den Western Blot wird eine Bande bei ca. 36 kDa erwartet. Bestätigen Sie die Spezifität, indem Sie Proben mit λ-Phosphatase behandeln oder parallel nicht-phospho-eIF2α-Antikörper verwenden.
• Die berichtete Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ermöglicht multispzies-Studien; validieren Sie im entsprechenden ProbenSystem.
• Für IHC-P optimieren Sie die Antigen-Retrieval (z. B. Citratpuffer, pH 6,0) und die Verdünnung des Primärantikörpers. Verwenden Sie positive und negative Kontrollgewebe.

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