Phospho-EGFR-Y992 Kaninchen-pAk für WB und ELISA - P00533

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des epidermalen Wachstumsfaktor-Rezeptors

• Der epidermale Wachstumsfaktor-Rezeptor (EGFR), auch bekannt als ErbB-1 oder HER1, ist ein transmembraner Rezeptor-Tyrosinkinase. Ein alternativ gespleißtes Isoform 2 kann als Antagonist der EGF-Wirkung fungieren.
• Bei Bindung von Liganden der EGF-Familie (z. B. EGF, TGF-alpha, AREG, BTC, EREG, HBEGF) löst EGFR Homo- oder Heterodimerisierung und Autophosphorylierung aus, was die Downstream-Signalisierung einleitet. Verwandte Referenzen: PMID:12297049 PMID:15611079 PMID:17909029
• Der phosphorylierte Rezeptor aktiviert mindestens vier wichtige Downstream-Signalisierungsmodule: RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCgamma-PKC und STATs sowie NF-kappa-B. Verwandte Referenzen: PMID:27153536 PMID:11116146
• EGFR befindet sich hauptsächlich an der Zellmembran, wird aber auch im endoplasmatischen Retikulum, im Golgi-Apparat, in Endosomen, im Zellkern gefunden und kann sezerniert werden.
• Ubiquitär exprimiert; Isoform 2 findet sich auch in Eierstockkrebsen.
• EGFR unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Ubiquitinierung, Hydroxylierung, Methylierung und Palmitoylierung, was durch Schlüsselwörter wie 'Phosphoprotein', 'Ubl-Konjugation', 'Hydroxylierung', 'Methylierung', 'Lipoprotein', 'Palmitat', 'Glykoprotein' widergespie wird.
• Fungiert als Rezeptor für den Eintritt des Hepatitis-C-Virus (HCV) in Hepatozyten.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid, das dem Phosphorylierungsstandort Y992 von menschlichem EGFR entspricht. Es wird erwartet, dass dieser Antikörper spezifisch die phosphorylierte Form von EGFR an diesem Rest erkennt.
• Für Western Blot (WB) sollten während der Probenvorbereitung geeignete Phosphatase-Inhibitoren enthalten sein; erwägen Sie die Verwendung eines dephosphorylierten Kontrollproben, um die Phospho-Spezifität zu bestätigen.
• Dieser Antikörper wurde gezeigt, mit menschlichem und murinem EGFR durch WB und ELISA zu reagieren. Die Kreuzreaktivität mit anderen Spezies oder posttranslationalen Modifikationen sollte empirisch im relevanten Probensystem validiert werden.
• Bei der Durchführung von ELISA wird die Optimierung der Beschichtungsbedingungen und Nachweissysteme empfohlen, um ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis zu erzielen.

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