Phospho-EGFR-Y1086 Kaninchen pAb für WB, ELISA – P00533

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von EGFR

• EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor, Epidermaler Wachstumsfaktorrezeptor), auch bezeichnet als ErbB-1 oder HER1, ist ein Mitglied der ErbB-Familie der Rezeptor-Tyrosinkinasen. Er wird weithin in Epithelgewebe und anderen Geweben exprimiert. Eine alternative Isoform (Isoform 2) kann als Antagonist der EGF-Wirkung fungieren.
• EGFR bindet mehrere Liganden der EGF-Familie, darunter EGF, TGF-α, Amphiregulin und Epigen, was zur Rezeptordimerisierung und Autophosphorylierung an cytoplasmatischen Tyrosinresten führt. Verwandte Referenzen: PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960, PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• Nach der Aktivierung rekrutiert EGFR Adapterproteine und stimuliert wichtige Signalkaskaden wie die RAS-RAF-MEK-ERK-, PI3K-AKT-, PLCγ-PKC- und STAT-Signalwege, die Proliferation, Überleben und Differenzierung steuern. Verwandte Referenzen: PMID:27153536
• EGFR aktiviert zusätzlich die NF-kappa-B-Signalgebung und kann Substratproteine wie RGS16 (G-Protein-Signalisierungsmodulator), MUC1 (Zelladhäsion/Wnt) und CCDC88A/GIV (Migrationspromotor) direkt phosphorylieren, wodurch seine Aktivität mit vielfältigen zellulären Prozessen verknüpft ist. Verwandte Referenzen: PMID:11116146, PMID:11602604, PMID:11483589, PMID:20462955
• Subzellulär befindet sich EGFR hauptsächlich an der Zellmembran, wird aber auch im Endoplasmatischen Retikulum, Golgi-Apparat, Zellkern, Endosomen nachgewiesen und kann sekretiert werden.
• Er wird ubiquitätär in menschlichen Geweben exprimiert; Isoform 2 ist besonders bei Eierstockkrebs exprimiert.
• (Mikrobielle Infektion) EGFR dient als Wirtszellrezeptor für den Eintritt des Hepatitis-C-Virus (HCV) in Hepatozyten, indem es die Bildung des CD81-CLDN1-Rezeptorkomplexes fördert.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen dieses Antikörpers ist ein synthetisches Phosphopeptid um Y1086 des humanen EGFR, das entwickelt wurde, um spezifisch die phosphorylierte Form zu erkennen.
• Für Western Blot bereiten Sie Lysate aus EGFR-positiven menschlichen Zelllinien (z. B. A431 oder HeLa) mit und ohne EGF-Stimulation vor; eine Bande bei ~134 kDa bestätigt die Erkennung.
• Für ELISA verwenden Sie den Antikörper zur Capture oder Detektion von Phospho-EGFR in menschlichen Zelllysaten oder Gewebeextrakten; optimieren Sie Beschichtungs- und Detektionsbedingungen entsprechend Ihrem Assay-Plattform.
• Stellen Sie sicher, dass Phosphatase-Inhibitor-Cocktails während der Lyse und Probenhandhabung zugesetzt werden, um das Phosphorylierungssignal zu erhalten.
• Da die Kreuzreaktivität auf humanes EGFR beschränkt ist, validieren Sie den Antikörper in Ihren humanen ProbenSystemen.

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