Phospho-EGFR-Y1045 Kaninchen pAb für WB, ELISA - P00533

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von EGFR

• Der Epidermale Wachstumsfaktor-Rezeptor (EGFR) ist eine Rezeptor-Tyrosinkinase, die an Liganden der EGF-Familie wie EGF, TGF-alpha, AREG, BTC, EREG und HBEGF bindet, um nachgeschaltete Signalwege auszulösen. Zugehörige Referenzen: PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• Die Ligandenbindung induziert Homo- und/oder Heterodimerisierung des Rezeptors sowie Autophosphorylierung an wichtigen zytoplasmatischen Tyrosinresten wie Y1045. Dadurch entstehen Bindungsstellen für Adapterproteine wie GRB2 und Signalkaskaden wie RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCgamma-PKC und STAT werden aktiviert. Zugehörige Referenzen: PMID:27153536
• EGFR phosphoryliert Substrate wie RGS16 und MUC1 direkt und reguliert Zellmigration, Lernen, Gedächtnis und Schmerzsignalgebung. Zugehörige Referenzen: PMID:11602604, PMID:11483589, PMID:20462955
• Isoform 2 wirkt möglicherweise als Antagonist der EGF-Wirkung und wird insbesondere bei Ovarialkarzinomen exprimiert.
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst Plasmamembran, Endosomen, Golgi-Apparat, Endoplasmatisches Retikulum, Zellkern und sekretierte Formen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, Glykosylierung, Ubiquitinierung und Palmitoylierung, wie auch die Schlagworte Phosphoprotein, Glykoprotein und Lipoprotein verdeutlichen.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um Y1045; verwenden Sie Phosphatase-Inhibitoren bei der Probenvorbereitung, um die Phosphorylierung zu erhalten.
• Für den Western Blot empfehlen wir das Laden von EGF-stimulierten vs. nicht stimulierten Zelllysaten als Positiv- und Negativkontrolle sowie eine Titration des Antikörpers für ein optimales Signal.
• Ein direkter ELISA kann durchgeführt werden; optimieren Sie Beschichtungs- und Detektionsbedingungen empirisch für Ihr spezifisches Assayformat.
• Kreuzreaktivität wurde für humanes EGFR nachgewiesen; für andere Spezies ist eine Validierung aufgrund möglicher Sequenzunterschiede erforderlich.
• Bestätigen Sie die Spezifität durch Peptid-Kompetition oder Phosphatase-Behandlung in relevanten biologischen Proben.

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