Phospho-DRP1-S616 Kaninchen-mAk - O00429

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: DRP1-Funktion und Lokalisierung

• Dynamin-1-ähnliches Protein (DNM1L), allgemein als DRP1 bezeichnet, ist ein Mitglied der Dynamin-Superfamilie großer GTPasen und wird auch als DLP1, DVLP und Dymple bekannt.
• DRP1 vermittelt mitochondriale und peroxisomale Spaltung, indem es zu membranassoziierten tubulären Strukturen oligomerisiert, die Spaltungsstellen umhüllen und Membranen durch einen GTP-Hydrolyse-abhängigen Mechanismus verengen und durchtrennen. Verwandte Referenzen: PMID:11514614, PMID:12499366, PMID:17301055, PMID:23530241, PMID:23584531, PMID:33850055
• Die Rekrutierung an mitochondriale Membranen wird durch Rezeptoren wie MFF, MIEF1 und MIEF2 auf GTP-abhängige Weise angetrieben; anschließende GTP-Hydrolyse setzt DRP1 frei und ermöglicht es Filamentringen, sich zu schließen und die Doppelmembran zu durchtrennen. Verwandte Referenzen: PMID:23283981, PMID:23921378, PMID:29899447
• DRP1 fördert die mitochondriale Spaltung während der Mitose und wirkt stromabwärts von PINK1 in einem PRKN-abhängigen Weg, und seine rhythmische Phosphorylierung an Ser-637 steuert die zirkadiane ATP-Produktion. Verwandte Referenzen: PMID:19411255, PMID:26992161, PMID:27301544, PMID:29478834, PMID:32484300
• DRP1 wird für die normale Gehirnentwicklung, einschließlich des Kleinhirns, benötigt und ist für das Überleben postmitotischer Neuronen durch Unterdrückung oxidativer Schäden unerlässlich; es erleichtert auch die entwicklungsbedingte Apoptose während der Neuralrohrbildung. Verwandte Referenzen: PMID:17460227, PMID:26992161, PMID:27145208
• Ubiquitär exprimiert mit höchsten Spiegeln in Skelettmuskel, Herz, Niere und Gehirn; mehrere Isoformen zeigen gewebespezifische Muster, einschließlich einer hirnspezifischen Isoform 1 und testis-/skelettmuskelangereicherten Isoformen 2 und 3.
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst die mitochondriale Außenmembran, Peroxisomen, Zytosol, Golgi-Apparat, Clathrin-bedeckte Gruben und synaptische Vesikelmembranen; DRP1 unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung, S-Nitrosylierung und Ubiquitinierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid, das Resten um Ser-616 von humanem DRP1 entspricht. Es wird erwartet, dass der Antikörper DRP1 spezifisch erkennt, nur wenn es an dieser Stelle phosphoryliert ist.
• Für Western Blotting sollten Phosphataseinhibitoren während der Probenvorbereitung in Betracht gezogen werden, um das S616-Phosphorylierungssignal zu erhalten, und das Band bei dem vorhergesagten Molekulargewicht von 82 kDa in Ihrem experimentellen System validieren.
• Bei der Immunpräzipitation sollte die Antikörpermenge titriert und optimierte Lysepuffer verwendet werden, um das Phospho-Epitop zu erhalten; die Spezifität durch Phosphatase-Behandlungs-Kontrollen bestätigen.
• Für ELISA-Anwendungen, einschließlich kompetitiver Peptid-Assays, sollte die Reaktivität des Antikörpers gegen das phosphorylierte vs. nicht-phosphorylierte Peptid verifiziert werden, um die Phospho-Spezifität sicherzustellen.

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