Phospho-Cyclin D1 (T286) Kaninchen polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P24385

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Cyclin D1

• Cyclin D1 (CCND1) ist ein G1/S-spezifisches Cyclin, auch bekannt als B-Zell-Lymphom 1-Protein (BCL-1) und PRAD1-Onkogen.
• Es fungiert als regulatorische Untereinheit des Cyclin D1-CDK4-Komplexes, der Retinoblastom(RB)-Familienproteine phosphoryliert, um E2F-Transkriptionsfaktoren freizusetzen und dadurch den G1/S-Übergang zu fördern. Verwandte Referenzen: PMID:1827756, PMID:1833066, PMID:19412162
• Darüber hinaus wirkt Cyclin D1 als Substrat für SMAD3 und hemmt die transkriptionelle Aktivität von SMAD3; bildet es einen ternären Komplex mit CDK4 und CDKN1B für den Kerneintrag; und übt es Corepressor-Aktivität mit INSM1 an Promotoren unabhängig vom Zellzyklus aus. Verwandte Referenzen: PMID:15241418, PMID:9106657, PMID:16569215, PMID:18417529
• Subzellulär befindet sich Cyclin D1 im Kern, im Zytoplasma und an der Kernmembran.
• Posttranslationale Modifikationen: Cyclin D1 ist ein Phosphoprotein, für das Isopeptidbindungen und ubiquitin-ähnliche Konjugationen dokumentiert sind.
• Cyclin D1 ist ein wichtiger Zellzyklusregulator und Protoonkogen, der durch Chromosomenumlagerungen an Krebs beteiligt ist.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches Phosphopeptid gerichtet, das den Resten um Thr-286 von menschlichem Cyclin D1 entspricht; berücksichtigen Sie seine Eignung für den Nachweis von endogenem phosphoryliertem Cyclin D1 in stimulierten oder proliferierenden Zellen.
• Für das Western Blotting ist eine Hauptbande um 34 kDa zu erwarten; die Zugabe von Phosphataseinhibitoren zum Lysepuffer wird empfohlen, um die Phosphorylierungssignale zu erhalten.
• In der Immunhistochemie (IHC-P) sollten optimale Antigen-Retrieval- und Blockierungsbedingungen optimiert werden; die Phosphospezifität kann durch Phosphatasebehandlung oder Phosphoblocking-Peptidkonkurrenz bestätigt werden.
• ELISA-Anwendungen können eine Titration von Antikörper- und Antigenkonzentrationen erfordern; validieren Sie die Assayspezifität mit nicht phosphorylierten Peptidkontrollen.
• Kreuzreaktivität ist für Proben von Mensch, Maus und Ratte angegeben; dennoch wird eine Sequenzalignment des Immunogens mit der Zielart empfohlen, um die Konservierung zu bestätigen.

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