Phospho-CREB1-S133 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, FC (intra), ELISA - P16220

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CREB1-Funktion und -Lokalisierung

• Cyclic AMP-responsive element-binding protein 1 (CREB1) ist ein phosphorylierungsabhängiger Transkriptionsfaktor, der an das cAMP-Response-Element (CRE) in der DNA bindet.
• CREB1 stimuliert die Transkription nach Bindung an CRE, eine Sequenz, die in vielen viralen und zellulären Promotoren vorhanden ist; die Aktivierung wird durch TORC-Coaktivatoren verstärkt, die unabhängig von der Ser-119-Phosphorylierung wirken. Verwandte Referenzen: PMID:14536081
• Es ist an diversen zellulären Prozessen beteiligt, einschließlich der Synchronisation der zirkadianen Rhythmik und der Differenzierung von Fettzellen.
• In Kardiomyozyten reguliert CREB1 die Expression von apoptotischen und Entzündungsreaktionsfaktoren als Reaktion auf ERFE-vermittelte AKT-Signalgebung.
• Das Protein lokalisiert ausschließlich im Zellkern, was seiner Rolle als Transkriptionsfaktor entspricht.
• CREB1 ist ein Phosphoprotein, das alternatives Spleißen unterliegt, und wurde in chromosomalen Umordnungen identifiziert, was seine regulatorische Komplexität und Krankheitsrelevanz unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper erkennt eine Phosphorylierungsstelle; um das Signal zu erhalten, sollten Sie während der Probenvorbereitung Phosphatase-Inhibitoren hinzufügen.
• Führen Sie für Western Blots parallele Blots mit einem pan-CREB-Antikörper durch, um Änderungen der Phosphorylierung von den Gesamtproteinpegeln zu unterscheiden.
• Bei IHC-P können bestimmte Antigen-Retrieval-Methoden das Epitop dephosphorylieren; optimieren Sie die Retrieval-Bedingungen (z. B. mildere Hitze oder enzymatisches Retrieval), um die Reaktivität zu erhalten.
• Verwenden Sie bei der intrazellulären Durchflusszytometrie Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle, die darauf ausgelegt sind, phosphorylierte Epitope zu erhalten, und schließen Sie geeignete Isotyp-Kontrollen ein.
• ELISA-Formate sollten in der relevanten biologischen Matrix validiert werden; erwägen Sie für eine optimale Empfindlichkeit einen phospho-spezifischen Capture- oder Detektionsansatz.

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