Phospho-CREB1-S129 Kaninchen pAb - P16220-1

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CREB1

• CREB1, auch als CREB oder CREB-1 bezeichnet, steht für Cyclic AMP-responsive element-binding protein 1, ein Transkriptionsfaktor, der zentral für die cAMP-vermittelte Signalgebung ist.
• Das menschliche CREB1-Gen (GenID: 1385) kodiert durch alternatives Spleißen mehrere Isoformen; der UniProt-Eintrag P16220-1 entspricht der Isoform 2.
• Isoform 2 von CREB1 hat eine berechnete Molekülmasse von 36688 Dalton, was mit der im Western Blot beobachteten Bande von ~36–37 kDa übereinstimmt.
• Die Phosphorylierung an Serin 129 ist eine wichtige posttranslationale Modifikation, die die transkriptionelle Aktivität von CREB1 und seine Interaktion mit Koregulatoren beeinflussen kann.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Um die labile Phosphorylierung während der Zell- oder Gewebslyse zu erhalten, fügen Sie Phosphataseinhibitoren hinzu und arbeiten Sie auf Eis; vermeiden Sie eine langfristige Probenlagerung, es sei denn, die Proben wurden schockgefroren.
• Laden Sie für den Western Blot 20–50 µg Gesamtprotein pro Spur auf und inkubieren Sie nach Überprüfung der Transfereffizienz mit dem Antikörper; für menschliches und Ratten-CREB1 wird eine Bande in der Nähe von 36–37 kDa erwartet.
• Im ELISA empfehlen Sie einen Peptid-Konkurrenzassay (mit dem Immunogenpeptid im Vergleich zu einem nicht phosphorylierten Peptid), um die Phosphospezifität zu bestätigen.
• Validieren Sie den Antikörper immer in Ihrem experimentellen System mit geeigneten Kontrollen, wie z. B. mit Phosphatase behandelten Proben oder Zelllinien mit bekannten CREB1-Aktivierungszuständen.

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