Phospho-Chk2-S516 Kaninchen pAb - O96017

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der Serin/Threonin-Proteinkinase Chk2

• Serin/Threonin-Proteinkinase, die die DNA-Schadensantwort vermittelt, indem sie nachgeschaltete Effektoren an der Konsensussequenz [L-X-R-X-X-S/T] phosphoryliert und so den Zellzyklusarrest, die DNA-Reparatur und die Apoptose reguliert (PubMed:37943659).
  Verwandte Referenzen: PMID:37943659
• Steuert Zellzyklus-Kontrollpunkte durch Phosphorylierung der Phosphatasen CDC25A, CDC25B und CDC25C, hemmt deren Aktivität und blockiert den Zellzyklusfortschritt. Phosphoryliert auch NEK6, um den G2/M-Arrest durchzusetzen.
• Fördert die DNA-Reparatur durch Phosphorylierung von BRCA2, was die Rekrutierung von RAD51 für die homologe Rekombination verbessert, und aktiviert FOXM1, um die Transkription von Reparaturgenen zu stimulieren.
• Reguliert die Apoptose durch Phosphorylierung von p53 an Ser-20, um die MDM2-Hemmung aufzuheben, was zur Stabilisierung von p53 führt; phosphoryliert auch MDM4 und PML, um die apoptotische Signalgebung weiter zu fördern.
• Zeigt Tumorsuppressor-Funktionen: Erhält die chromosomale Stabilität durch BRCA1-Phosphorylierung für den Aufbau des mitotischen Spindelapparats und ist an der CCAR2-vermittelten SIRT1-Hemmung beteiligt (PubMed:25361978).
  Verwandte Referenzen: PMID:25361978
• Unter oxidativem Stress fördert es die Autophagie durch Phosphorylierung von TRIM32 an Ser-55, was zur Ubiquitinierung von ATG7 und einer verstärkten Autophagosomenbildung führt (PubMed:37943659).
  Verwandte Referenzen: PMID:37943659
• Auch an Wirt-Virus-Interaktionen beteiligt: phosphoryliert das Herpes-simplex-Virus-Protein ICP0 und aktiviert dessen SUMO-gerichtete Ubiquitin-Ligase-Aktivität.
• Lokalisiert hauptsächlich im Zellkern (einschließlich PML-Körper und Nucleoplasma) und ist hoch exprimiert in Hoden, Milz, Kolon und peripheren Blutleukozyten.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Um das Phosphorylierungssignal im Western Blot zu erhalten, sollten Phosphatase-Inhibitoren während der Probenvorbereitung verwendet werden. Ziehen Sie in Betracht, DNA-Schäden (z.B. durch ionisierende Strahlung oder chemotherapeutische Medikamente) zu induzieren, um die Ser516-Phosphorylierung zu verstärken.
• Für ELISA-Anwendungen: Validieren Sie den Antikörper mit phosphorylierten Peptidstandards und geeigneten Kontrollen; er kann sowohl als Capture- als auch als Detektionsreagenz verwendet werden.
• Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-Chk2 wurde berichtet; validieren Sie die Reaktivität in Ihrem spezifischen experimentellen System unter Verwendung relevanter Gewebelysate oder Zelllinienextrakte.
• Titreren Sie die Antikörperkonzentration empirisch, um optimale Signal-Rausch-Verhältnisse in Ihrem Versuchsaufbau zu erreichen.

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