Phospho-Chk1-S280 Kaninchen-pAk - O14757

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Chk1-Funktion und -Lokalisierung

• Chk1 ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die für den durch DNA-Schadens-Kontrollpunkte vermittelten Zellzyklusarrest und die Aktivierung der DNA-Reparatur essentiell ist. Verwandte Referenzen: PMID:11535615, PMID:12399544, PMID:12446774
• Sie phosphoryliert CDC25-Phosphatasen (CDC25A, CDC25B, CDC25C) an spezifischen Serin- und Threoninresten, schafft 14-3-3-Bindungsstellen oder fördert den Proteolyse, wodurch CDK-Cyclin-Komplexe inhibiert und der Zellzyklusfortschritt blockiert wird. Verwandte Referenzen: PMID:12676583, PMID:12676925, PMID:12759351, PMID:9278511
• Chk1 phosphoryliert auch RAD51 an Thr-309, was die Chromatin-Assoziation und die homologe Rekombinationsreparatur verstärkt. Verwandte Referenzen: PMID:15665856
• Sie phosphoryliert TP53 an mehreren C-terminalen Stellen, fördert die Acetylierung und Aktivierung der p53-abhängigen Zellzyklusarrest und unterdrückt die Proliferation. Verwandte Referenzen: PMID:10673501, PMID:15659650, PMID:16511572
• Chk1 lokalisiert sich primär im Zellkern, auf Chromosomen, im Zytoplasma und an den Zentrosomen, was ihre vielfältigen Rollen bei der Genomerhaltung widerspiegelt.
• Sie ist ubiquitär exprimiert mit der höchsten Häufigkeit in Thymus, Hoden, Dünndarm und Dickdarm.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen die Phosphorylierung an Ser-280 (Autophosphorylierungsstelle, die von diesem Antikörper zielgerichtet wird) sowie Ubiquitinierung und Acetylierung.
• Schlüsselwörter: ATP-Bindung, Zellzyklus, DNA-Schaden, DNA-Reparatur, Kinase, Phosphoprotein, alternatives Spleißen, Krankheitsvariante, Isopeptidbindung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um Ser280 von humanem Chk1; erwägen Sie die Überprüfung der Phospho-Spezifität mittels phosphatasebehandelter Proben.
• Für WB: Fügen Sie Phosphatase-Inhibitoren zum Lysepuffer hinzu, um die Phosphorylierung an Ser280 zu erhalten.
• Der Antikörper ist spezifiziert für WB, IHC-P und ELISA; optimieren Sie die Verdünnungen empirisch im relevanten Probensystem.
• Eine Kreuzreaktivität wird für Mensch, Maus und Ratte berichtet; validieren Sie in Geweben oder Zelllinien, die bekanntermaßen Chk1 exprimieren, insbesondere solche mit hoher Expression (z. B. Thymus, Hoden, Dünndarm, Dickdarm).

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