Phospho-CGAS (S420) Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB und ELISA - Q8C6L5

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CGAS

• CGAS (zyklische GMP-AMP-Synthase) ist eine Nukleotidyltransferase, die die Bildung von 2',3'-cGAMP aus ATP und GTP katalysiert – ein Second Messenger, der für die angeborene Immunität unverzichtbar ist. Verwandte Referenzen: PMID:23258413 PMID:23647843 PMID:23722158

• Wirkt als wichtiger zytosolischer DNA-Sensor, der doppelsträngige DNA direkt bindet, um flüssigkeitsähnliche Tröpfchen zu induzieren, die CGAS aktivieren. Dies führt zu einer STING1-abhängigen Produktion von Typ-I-Interferonen. Verwandte Referenzen: PMID:23722158 PMID:28095500 PMID:28314590

• Bindet bevorzugt lange doppelsträngige DNA (ca. 45 bp) und bildet leiternetzartige Strukturen, die cGAS-dsDNA-Komplexe kooperativ stabilisieren. Verwandte Referenzen: PMID:28902841

• Erkennt fremde DNA von Viren, Retroviren und Bakterien, aber auch endogene eigene DNA, die während zellulärer Stresssituationen (z. B. mitochondrialer Stress, Seneszenz, Mikrokerngrößenbildung) austritt. Verwandte Referenzen: PMID:23258413 PMID:23647843 PMID:23722158 PMID:23929945 PMID:28738408 PMID:28759028

• 2',3'-cGAMP kann über Gap Junktionen oder virale Partikel zu benachbarten Zellen übertragen werden und so die antivirale Immunität ausbreiten. Verwandte Referenzen: PMID:24077100 PMID:26229117 PMID:31992625

• In gesunden Zellen wird nukleäres CGAS durch Chromatinbindung inaktiv gehalten, um Autoimmunität zu verhindern; dennoch unterdrückt es die DNA-Reparatur durch Interaktion mit PARP1. Verwandte Referenzen: PMID:30356214 PMID:31544964 PMID:31808743 PMID:32911480 PMID:32911481 PMID:35210392

• Die subzelluläre Lokalisation umfasst Zellkern, Chromosomen, Zytoplasma, Zytosol und Zellmembran. Das Protein unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen wie Phosphorylierung, Acetylierung und Palmitoylierung, die seine Aktivität und Lokalisation regulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um Serin 420 von Maus-CGAS. Dieses Design gewährleistet die Spezifität für die phosphorylierte Form. Erwägen Sie eine Phosphatasebehandlung der Proben, um die Phospho-Spezifität im Western Blot zu bestätigen.
• Für Western Blot (WB) ist basierend auf dem vorausgesagten Molekulargewicht eine Bande bei ca. 58 kDa zu erwarten. Validieren Sie Antikörperverdünnung und Belichtungszeiten in Ihrem Probensystem.
• Für ELISA kombinieren Sie den Antikörper mit einem passenden Detektionsantikörper und optimieren Sie die Konzentrationen von Beschichtungsantigen und Antikörper. Testen Sie die Kreuzreaktivität mit menschlichem und Ratten-CGAS zur Bestätigung der Reaktivität.
• Führen Sie geeignete Kontrollen durch (unstimulierte vs. stimulierte Zellen, Phosphatase-behandelte Lysate), um sicherzustellen, dass das nachgewiesene Signal phosphorylierungsabhängig ist.

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