Phospho-CDKN1B/p27KIP1-T187 Kaninchen pAb für WB - P46527

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CDKN1B/p27KIP1-Funktion und Lokalisierung

• CDKN1B kodiert für den Cyclin-abhängigen Kinase-Inhibitor 1B, auch bekannt als p27Kip1, einen kritischen Regulator der Zellzyklusprogression.
• Es hemmt die Kinaseaktivität von CDK2, das an Cyclin A gebunden ist, während es wenig Wirkung auf CDK2-SPDYA-Komplexe zeigt, und blockiert wirksam Cyclin E- und Cyclin A-CDK2-Aktivität, was den G1-Arrest fördert. Verwandte Referenzen: PMID:28666995
• p27Kip1 bildet Komplexe mit Cyclin D-CDK4 und moduliert die CCND1-CDK4-Komplexbildung und -Aktivierung, wobei es je nach Phosphorylierungszustand entweder als Inhibitor oder Aktivator wirkt.
• Subzellulär befindet sich p27 hauptsächlich im Zellkern, kann aber auch im Zytoplasma und in Endosomen lokalisiert sein, wobei seine Lokalisierung seine regulatorischen Funktionen beeinflusst.
• Die Gewebeexpression ist breit, wobei das Protein in allen getesteten Geweben nachgewiesen wurde; die höchste Expression wird im Skelettmuskel beobachtet, während niedrigere Spiegel in Leber und Niere gefunden werden. Verwandte Referenzen: PMID:15509543, PMID:8033212
• Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt etwa 22 kDa.
• p27 wird als Phosphoprotein mit Proteinkinase-Inhibitor- und Tumorsuppressor-Aktivitäten klassifiziert und unterliegt einer Ubiquitin-Konjugation, was seine strenge posttranslationale Regulation widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da dieser Antikörper gegen ein phospho-spezifisches Peptid um T187 hergestellt wurde, detektiert er CDKN1B/p27KIP1 wahrscheinlich spezifisch, wenn es an diesem Rest phosphoryliert ist. Validieren Sie die Phosphorylierungsspezifität mit Phosphatase-behandelten Proben oder nicht-phosphorylierbaren Mutanten.
• Für Western Blot (WB) sollten frische Zell- oder Gewebelysate verwendet werden, die mit Phosphatase-Inhibitoren hergestellt wurden, um das Phosphorylierungssignal zu erhalten; eine Bande nahe 22 kDa ist zu erwarten.
• Angesichts der allgegenwärtigen Gewebeexpression können mehrere humane Zelllinien oder Gewebetypen als positive Kontrollen dienen; die Signalintensität kann jedoch je nach Zellzyklusstatus variieren.
• Die polyklonale Natur des Kaninchen-Antikörpers kann eine robuste Detektion unter verschiedenen denaturierenden und reduzierenden Bedingungen ermöglichen; optimieren Sie Blockierungs- und Verdünnungsbedingungen experimentell.

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