Phospho-Cdk1/2-T14 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA – P06493 / P24941

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CDK1/CDK2

• CDK1 (Cyclin-abhängige Kinase 1), auch bekannt als CDC2 oder p34-Proteinkinase, ist ein Hauptregulator des eukaryotischen Zellzyklus und fördert den G2-M-Übergang durch Assoziation mit mehreren Interphase-Cyclinen und Phosphorylierung zahlreicher Substrate. Zugehörige Referenzen: PMID:16407259 PMID:16933150 PMID:17459720

• Die Phosphorylierung an Thr-14 (und Tyr-15) durch die Kinasen WEE1 und PKMYT1 hemmt die CDK1-Aktivität und stellt einen entscheidenden Checkpoint für die DNA-Schadensantwort und die korrekte Zeitsteuerung der Mitose dar. Zugehörige Referenzen: PMID:18480403 PMID:20360007

• Die Dephosphorylierung an Thr-14 durch CDC25-Phosphatasen aktiviert CDK1-Cyclin-Komplexe und löst Chromosomenkondensation, Kernhüllenzusammenbruch und Spindelaufbau aus. Zugehörige Referenzen: PMID:18480403 PMID:20360007 PMID:2188730

• CDK1 lokalisiert im Kern, Zytoplasma, den Mitochondrien, dem Zentrosom und der mitotischen Spindel, was seine vielfältigen Funktionen während der Zellteilung widerspiegelt.

• CDK1 wird in proliferierenden Geweben exprimiert und kommt in Brustkrebs vor, wobei seine Fehlregulation zur unkontrollierten Zellproliferation beiträgt.

• Jenseits der Mitose ist CDK1 an der Apoptose und der circadianen Rhythmusregulation beteiligt und dient als Wirtszellrezeptor für den Eintritt des Hepatitis-C-Virus.

• Das Paraloge CDK2 weist eine hohe Homologie auf und wird ähnlich durch Thr-14-Phosphorylierung reguliert, was die Anwendbarkeit des Antikörpers in der Zellzyklusforschung erweitert.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid um Thr-14 von humaner CDK1 mit vorausgesagter Kreuzreaktivität zu CDK2; es wird empfohlen, die Spezifität durch Phosphatasebehandlung oder kompetitive Hemmung mit nicht phosphoryliertem Peptid zu überprüfen.

• Beim Western Blot wird die beobachtete Bande erwartungsgemäß in der Nähe von 34 kDa liegen; die Signalintensität kann je nach Zellzyklusphase variieren, daher ist die Verwendung synchronisierter Zellpopulationen oder mitotischer Marker empfehlenswert.

• Bei ELISA-Anwendungen kann eine Vorbeschichtung mit dem Phosphopeptid-Antigen und geeignete Blockierung die Assay-Empfindlichkeit erhöhen; verwenden Sie immer passende Positiv- und Negativkontrollen.

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