Phospho-BRD4-T204 Kaninchen pAb - O60885

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von BRD4

• Bromodomain-haltiges Protein 4 (BRD4), auch bekannt als HUNK1, ist ein Chromatin-Leseprotein, das acetylierte Histone erkennt und bindet. Es spielt eine Schlüsselrolle für das epigenetische Gedächtnis und die Transkriptionsregulation. Verwandte Referenzen: PMID:20871596, PMID:23086925, PMID:23317504
• Es bleibt während des gesamten Zellzyklus an acetyliertes Chromatin gebunden und erhält den Chromatinstatus für die postmitotische G1-Gentranskription. Verwandte Referenzen: PMID:22334664, PMID:23317504, PMID:23589332
• BRD4 reguliert die signalinduzierte Gentranskription, indem es den P-TEFb-Komplex an Promotoren und distale Enhancer rekrutiert und die Phosphorylierung der C-terminalen Domäne der RNA-Polymerase II fördert. Verwandte Referenzen: PMID:16109376, PMID:16109377, PMID:19596240
• Neben Histonen bindet es acetyliertes RELA und aktiviert so den NF-kappa-B-Signalweg. Verwandte Referenzen: PMID:19103749
• Durch Phosphorylierung via CK2 wird BRD4 an p53/TP53-spezifische Zielpromotoren rekrutiert, wo es die p53-vermittelte Transkription moduliert. Verwandte Referenzen: PMID:23317504
• Es wirkt als Chromatin-Insulator in der DNA-Schadensantwort, indem es Condensin-2 an acetylierte Histone rekrutiert und die Ausbreitung der H2AX-Phosphorylierung begrenzt.
• Die subzelluläre Lokalisation ist primär nuklear, das Protein ist mit Chromosomen assoziiert.
• Es ist ubiquitär in allen Geweben exprimiert und ist an vielfältigen regulatorischen Prozessen beteiligt.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Da dieser Antikörper gegen die Phosphorylierung an T204 gerichtet ist, müssen Proben unbedingt mit Phosphatase-Inhibitoren aufbereitet werden, um das Phospho-Signal zu erhalten.
• Für den Western Blot empfehlen sich geeignete Ladekontrollen sowie die Validierung der Bandenspezifität durch Phosphatase-Behandlung oder Mutanten-Kontrollen.
• Beim ELISA können eine Optimierung des beschichteten Antigens und der Detektionsbedingungen erforderlich sein.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte deutet auf ein konserviertes Epitop hin; die Leistung sollte im probenbezogenen System der jeweiligen Spezies überprüft werden.

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