Phospho-BRD4-S498/S499 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - O60885

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: BRD4-Funktion und -Lokalisierung

• BRD4 ist ein Chromatin-Leser, der acetylierte Histone erkennt und bindet und eine Schlüsselrolle bei der Übertragung der epigenetischen Speicherung über Zellteilungen hinweg sowie bei der Transkriptionsregulation spielt (PubMed:20871596, PubMed:23086925, PubMed:23317504). Verwandte Referenzen: PMID:20871596, PMID:23086925, PMID:23317504
• Es bleibt während des gesamten Zellzyklus mit acetyliertem Chromatin assoziiert und stellt epigenetische Speicher für die postmitotische G1-Gen-Transkription bereit, indem es den acetylierten Chromatinstatus erhält und die Chromatinstruktur aufrechterhält (PubMed:22334664, PubMed:23317504, PubMed:23589332). Verwandte Referenzen: PMID:22334664, PMID:23317504, PMID:23589332
• Während der Interphase reguliert BRD4 die Transkription signalinduzierter Gene durch Assoziation mit dem P-TEFb-Komplex und dessen Rekrutierung an Promotoren und Enhancer, wodurch die Phosphorylierung der RNA-Polymerase II erleichtert wird (PubMed:16109376, PubMed:16109377, PubMed:19596240). Verwandte Referenzen: PMID:16109376, PMID:16109377, PMID:19596240
• Es wirkt auch als Chromatin-Isolator im DNA-Schadensreaktionsweg und hemmt die DNA-Schadenssignalisierung, indem es den Condensin-2-Komplex an acetylierte Histone rekrutiert und die Ausbreitung der H2AX-Phosphorylierung begrenzt.
• BRD4 erkennt acetyliertes RELA, was zur Rekrutierung von P-TEFb und Aktivierung von NF-kappa-B führt (PubMed:19103749). Verwandte Referenzen: PMID:19103749
• Nach Phosphorylierung durch CK2 wird BRD4 an p53/TP53-spezifische Ziel-Promotoren rekrutiert und reguliert die p53-vermittelte Transkription (PubMed:23317504). Verwandte Referenzen: PMID:23317504
• Die subzelluläre Lokalisierung ist primär nukleär, assoziiert mit Chromosomen während des gesamten Zellzyklus.
• Ubiquitäre Expression in allen Geweben.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um S498 & S499 des humanen BRD4 hergestellt; daher wird vorhergesagt, dass er spezifisch die phosphorylierte Form von BRD4 erkennt.
• Für Western Blotting sollten Sie die Verwendung von Phosphatase-Inhibitoren während der Lyse in Betracht ziehen und Proben mit alkalischer Phosphatase behandeln, um den phosphorylierungsspezifischen Nachweis zu bestätigen.
• Für ELISA kann der Antikörper zum Einfangen oder Detektieren von phosphoryliertem BRD4 verwendet werden; eine geeignete Peptid-Blockierung könnte die Spezifität erhöhen.
• Validieren Sie die Antikörperleistung in relevanten humanen Zelllinien oder Geweben, die BRD4 exprimieren, wie z. B. HeLa- oder Jurkat-Zellen, da BRD4 ubiquitär exprimiert wird.

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