Phospho-Beclin 1 (Ser15) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - Q14457

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Beclin-1-Funktion und Lokalisierung

• Beclin-1 (auch bekannt als Coiled-Coil-Myosin-ähnliches BCL2-interagierendes Protein, ATG6 oder VPS30) ist ein Kern-Autophagieprotein, das vom BECN1-Gen kodiert wird.
• Beclin-1 ist ein zentrales Autophagieprotein, das als Kerneinheit des Klasse-III-PI3K-Komplexes fungiert und die Produktion von Phosphatidylinositol-3-phosphat vermittelt. Verwandte Referenzen: PMID:18570871 PMID:21358617 PMID:23184933
• Es ist essentiell für die Bildung verschiedener PI3K-Komplexe: PI3KC3-C1 für die Autophagosomen-Initiation und PI3KC3-C2 für die Autophagosomen-Reifung und Endozytose. Verwandte Referenzen: PMID:20208530 PMID:20643123 PMID:23974797
• Beclin-1 ist am endozytischen Transport und dem Abschnürungsschritt der Zytokinese beteiligt. Verwandte Referenzen: PMID:25275521
• Ein 35 kDa Mitochondrien-Fragment von Beclin-1 fördert die Apoptose, indem es die BAX-Translokation und die Freisetzung pro-apoptotischer Faktoren induziert.
• Es lokalisiert zu mehreren Organellen: Zytoplasma, Golgi-Apparat, Endosomen, endoplasmatisches Retikulum, Mitochondrien, Autophagosomen und Zellkern, was mit seinen Rollen im Membrantransport übereinstimmt.
• Beclin-1 schützt vor Infektionen mit neurovirulentem Sindbis-Virus, was auf eine Rolle in der antiviralen Abwehr hindeutet.
• Beclin-1 unterliegt verschiedenen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung an Ser15, Acetylierung und Ubiquitinierung, die seine Funktionen regulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid, das spezifisch für Ser15 von humanem Beclin-1 ist. Um die Phospho-Spezifität zu bestätigen, sollten Sie in Ihrem Versuchsaufbau Phosphatase-behandelte Proben oder Peptid-Konkurrenz-Assays in Betracht ziehen.
• Für Western Blot ist eine Bande um 52 kDa zu erwarten. Optimieren Sie mit Gradientengelen und Transferbedingungen, die für Proteine dieses Molekulargewichts geeignet sind.
• Für ELISA kann die direkte Beschichtung mit dem Phosphopeptid-Antigen bei der Bewertung der Antikörperbindung helfen; optimieren Sie Beschichtungspuffer und Blockierbedingungen für Ihr Plattenformat.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-Beclin-1 ist angegeben; daher können Zelllinien oder Gewebelysate dieser Spezies für funktionelle Autophagie-Studien verwendet werden.
• Die Phosphorylierung von Beclin-1 kann transient sein; schließen Sie Phosphatase-Inhibitoren in Lysepuffer ein und verarbeiten Sie Proben schnell, um das Phospho-Epitop zu erhalten.

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