Phospho-ATR-S428 Kaninchen-Monoklonalantikörper für WB und ELISA - Q13535

Kernprodukt-Spezifikationen und -Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der Serin/Threonin-Proteinkinase ATR

• ATR ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase der PIKK-Familie, die als DNA-Schadenssensor wirkt, [ST]-Q-Konsensussequenzen erkennt und bei genotoxischem Stress downstream-Ziele phosphoryliert (PubMed:10597277, PubMed:10608806, PubMed:10859164). Verwandte Referenzen: PMID:10597277, PMID:10608806, PMID:10859164
• Wichtige Substrate umfassen CHEK1, BRCA1, p53/TP53, RPA2 und RAD17, deren Phosphorylierung die DNA-Replikation und Mitose hemmt sowie Reparatur, Rekombination und Apoptose fördert (PubMed:11114888, PubMed:11418864, PubMed:11865061). Verwandte Referenzen: PMID:11114888, PMID:11418864, PMID:11865061
• Phosphoryliert direkt Histon H2AX an Ser-139 an Schadensstellen und ist für die Ubiquitinierung von FANCD2 erforderlich (PubMed:11673449, PubMed:15314022). Verwandte Referenzen: PMID:11673449, PMID:15314022
• Kritisch für die Aufrechterhaltung der Stabilität fragiler Stellen und der korrekten Zentrosomvermehrung (PubMed:12526805). Verwandte Referenzen: PMID:12526805
• Reguliert den S-G2-Übergang durch Einschränkung der CDK1-Aktivität während der S-Phase (PubMed:30139873). Verwandte Referenzen: PMID:30139873
• Wirkt an der Kernhülle: spürt mechanischen Stress, relokalisiert dorthin, um CHEK1 zu phosphorylieren, und fördert den Riss der Kernhülle durch LMNA-Phosphorylierung; vermittelt auch den Riss von Mikrokernen und die Aktivierung der cGAS-STING angeborenen Immunantwort (PubMed:25083873, PubMed:37832547, PubMed:37788673). Verwandte Referenzen: PMID:25083873, PMID:37832547, PMID:37788673
• Reguliert positiv den Neustart gestoppter Replikationsgabeln nach Aktivierung durch das KHDC3L-OOEP-Gerüstkomplex.
• Überwiegend nukleär, assoziiert mit Chromosomen und der Kernhülle; ubiquitär exprimiert mit stärkster Präsenz in den Hoden; ein alternatives Isoform (Isoform 2) kommt nur in der Bauchspeicheldrüse, der Plazenta und der Leber vor.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper wurde gegen ein synthetisches Phospho-Peptid erhoben, das den Resten um Ser-428 von humanem ATR entspricht; die Spezifität sollte durch einen Wettbewerb mit phosphoryliertem gegenüber nicht-phosphoryliertem Peptid oder mit phosphatasbehandelten Lysaten bestätigt werden.
• Für Western Blots beachten Sie die große Größe von ATR (~301 kDa); verwenden Sie Gradientengele, verlängerte Transferzeiten und Marker mit hohem Molekulargewicht für eine optimale Detektion.
• Validierte Anwendungen sind WB und ELISA; Endbenutzer sollten den Antikörper titrieren, um die optimalen Arbeitskonzentrationen für ihre spezifischen Assay-Bedingungen zu ermitteln.
• Da ATR eine Kinase mit geringer Häufigkeit ist, kann eine Anreicherung oder Immunpräzipitation vor dem WB das Signal in einigen Probentypen verbessern.
• Lagern Sie den Antikörper gemäß den Versandbedingungen (Eisbeutel) und vermeiden Sie wiederholte Gefrier-Auftau-Zyklen.

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