Phospho-ATM-S1981 Kaninchen-Monoklonaler Antikörper für WB, IF-P, ELISA - Q13315

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ATM

• ATM ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die als primärer Sensor für DNA-Schäden dient. Sie erkennt Doppelstrangbrüche und löst Checkpoint-Signalübertragung, Apoptose und DNA-Reparaturwege aus. Verwandte Referenzen: PMID:10550055 PMID:10839545 PMID:10910365
• Sie erkennt die Substrat-Konsensussequenz [ST]-Q und phosphoryliert zahlreiche kritische Zielproteine, darunter H2AX (Ser139), CHEK2, p53, BRCA1 und multiple DNA-Reparaturproteine. Auf diese Weise koordiniert sie Zellzyklusarrest und Schadensantwort. Verwandte Referenzen: PMID:10550055 PMID:10766245 PMID:10802669
• ATM lokalisiert sich im Kern, an zytoplasmatischen Vesikeln, Zentrosomen und Peroxisomen. Dies spiegelt wider, dass es nicht nur an der nukleären DNA-Reparatur beteiligt ist, sondern auch an zytoplasmatischen Prozessen wie Vesikeltransport und Pexophagie. Verwandte Referenzen: PMID:26344566
• Es wird ubiquitätär in einem breiten Gewebespektrum exprimiert, darunter Bauchspeicheldrüse, Niere, Skelettmuskel, Leber, Lunge, Gehirn und lymphoide Organe – was mit seiner grundlegenden Rolle für die Genomstabilität übereinstimmt.
• ATM ist ein Phosphoprotein mit mehreren Phosphorylierungsstellen; Schlüsselmodifikationen regulieren seine Kinaseaktivität und Rekrutierung an DNA-Schadensstellen. Zusätzlich unterliegt es einer Acetylierung.
• Funktionsverlustmutationen im ATM-Gen verursachen die Ataxia teleangiectasia, eine multisystemische Erkrankung, die durch progressive Neurodegeneration, Immundefizienz und Krebsanfälligkeit gekennzeichnet ist.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Aufgrund der hohen Molekülmasse von ATM (351 kDa) sollten Sie für das Western Blotting verlängerte Transferzeiten oder modifizierte Transferpuffer in Betracht ziehen, um einen effizienten Proteintransfer sicherzustellen.
• Für den Nachweis von phosphoryliertem ATM fügen Sie während der Probenvorbereitung Phosphatase-Inhibitoren hinzu, um das S1981-Phosphorylierungssignal zu erhalten.
• In Immunpräzipitations- (IP/IF-P) Experimenten validieren Sie die Antikörperspezifität mit DNA-Schaden-induzierenden Mitteln (z. B. ionisierende Strahlung), um die ATM-Phosphorylierung zu stimulieren.
• Für die ELISA legen Sie optimale Beschichtungs- und Antikörperverdünnungen mit rekombinanten Phosphopeptid-Kontrollen fest, um die Selektivität für die S1981-phosphorylierte Form sicherzustellen.

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