Phospho-ATF2-T71 Kaninchen pAb für WB, IHC-P, ELISA - P15336

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von ATF-2

• ATF-2 (cyclisches AMP-abhängiger Transkriptionsfaktor ATF-2) ist ein Mitglied der ATF/CREB-Familie der Transkriptionsfaktoren; auch bekannt als CREB-2, HB16, CRE-BP1 und TREB7.
• Es fungiert als transkriptioneller Aktivator, bindet an CRE (5'-TGACGTCA-3') oder AP-1 (5'-TGACTCA-3') Konsensussequenzen – abhängig von seinem Bindungspartner – und reguliert Gene, die an Antiapoptose, Zellwachstum und DNA-Schadensantwort beteiligt sind.
• Im Kern beteiligt sich ATF-2 an der globalen Transkription und der DNA-Schadensantwort. Nach Phosphorylierung durch ATM trägt es zur ionisierende strahleninduzierten Kontrolle des S-Phasen-Checkpunkts und zur Rekrutierung des MRN-Komplexes an DNA-Schadensfoci bei.
• ATF-2 lokalisiert auch zum Zytoplasma und zur äußeren Mitochondrienmembran, wo es mit HK1 und VDAC1 interagiert, das mitochondriale Membranpotential beeinträchtigt, Leckagen induziert und den Zelltod fördert.
• Es besitzt eine intrinsische Histon-Acetyltransferase (HAT)-Aktivität und acetyliert spezifisch die Histone H2B und H4 in vitro. Verwandte Referenzen: PMID:10821277
• Darüber hinaus wirkt ATF-2 in einem Ubiquitin-Ligase-Komplex mit CUL3 und RBX1, um den Abbau von KAT5 zu fördern und dadurch die ATM-Acetylierung und -Aktivität zu modulieren.
• ATF-2 wird ubiquitär exprimiert, mit höchsten Konzentrationen im Gehirn, und durchläuft alternatives Spleißen, Acetylierung und Phosphorylierung (einschließlich an Thr71) als zentrale regulatorische Modifikationen.
• Schlüsselwörter, die mit ATF-2 verbunden sind, umfassen DNA-Bindung, Zinkfinger, Transkriptionsregulation und je nach Gewebekontext Tumorsuppressor-/onkogene Aktivitäten.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Der Antikörper wurde gegen ein synthetisches phosphoryliertes Peptid gerichtet, das die Position Thr71 von menschlichem ATF2 umgibt, was die Spezifität für die phosphorylierte Form gewährleistet. Für den Nachweis von totalem ATF2 (nicht phosphoryliert) empfehlen wir die Verwendung eines Pan-ATF2-Antikörpers.
• Im Western Blot erwarten Sie eine Bande bei ca. 55 kDa (vorhergesagtes Molekulargewicht ~54,5 kDa). Validieren Sie die Phosphospezifität durch Behandlung der Proben mit Phosphatase oder Verwendung eines nicht phosphorylierten Blockierungspeptids.
• Für IHC-P sollten die Antigen-Retrieval-Bedingungen für Ihren Gewebetyp optimiert werden; erwägen Sie Tests mit zirkathaltigen oder EDTA-basierten Retrival-Puffern.
• Für ELISA bestätigen Sie die optimale Beschichtungskonzentration und den Nachweisbereich in Ihrer spezifischen Versuchsanordnung.
• Der Antikörper weist Kreuzreaktivität mit Mensch, Maus und Ratte auf. Die Sequenzkonservierung um Thr71 bei anderen Arten kann eine breitere Reaktivität ermöglichen; validieren Sie dies in dem relevanten Probenystem.

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