Phospho-ATF2 (T69/T71) Kaninchen pAb für WB, IHC-P, ELISA - P15336

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ATF2-Funktion und -Lokalisierung

• Activating transcription factor 2 (ATF-2), auch bekannt als HB16, CREB2, TREB7 oder CRE-BP1, ist ein Mitglied der ATF/CREB-Familie von Transkriptionsfaktoren. Das Gen unterliegt alternativem Spleißen, was zu mehreren Isoformen führt.
• ATF-2 fungiert als transkriptioneller Aktivator, indem es an CRE (cAMP Response Element)-Konsensussequenzen (5'-TGACGTCA-3') oder AP-1 (Activator Protein 1)-Konsensussequenzen (5'-TGACTCA-3') bindet und so Gene reguliert, die an Anti-Apoptose, Zellwachstum, Proliferation und der DNA-Schadensantwort beteiligt sind.
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst den Zellkern, das Zytoplasma und die mitochondriale Außenmembran, was kontextabhängige Funktionen in Transkription, mitochondrialer Regulation und Apoptose ermöglicht.
• Im Zytoplasma interagiert ATF-2 mit Hexokinase-1 (HK1) und dem spannungsabhängigen Anionenkanal 1 (VDAC1) an der mitochondrialen Außenmembran, stört das mitochondriale Membranpotenzial und fördert den Zelltod.
• Die Phosphorylierung an Thr69 und Thr71 durch die ATM-Kinase ist entscheidend für die DNA-Schadensantwort. Phosphoryliertes ATF-2 ist an der durch ionisierende Strahlung (IR) induzierten S-Phasen-Kontrollpunktkontrolle beteiligt und rekrutiert den MRN-Komplex zu IR-induzierten Foci.
• ATF-2 weist eine intrinsische Histonacetyltransferase (HAT)-Aktivität auf, die spezifisch Histone H2B und H4 in vitro acetyliert, was Transkriptionsregulation mit Chromatinmodifikation verbindet. Verwandte Referenzen: PMID:10821277
• ATF-2 kann je nach Gewebe und zellulärem Kontext entweder onkogene oder tumorsupprimierende Aktivitäten zeigen. Es ist ubiquitär exprimiert, mit relativ höheren Spiegeln im Gehirn.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blot sollten frische Proteinproben mit Phosphataseinhibitoren verwendet werden, um die Phosphorylierung zu erhalten. Eine nicht-phosphorylierte Kontrolle einbeziehen, um die Phospho-Spezifität zu bestätigen.
• Bei IHC-P können Antigen-Retrieval-Methoden erforderlich sein; den Antikörper titrieren, um den Hintergrund zu minimieren, und mit Gewebe validieren, von dem bekannt ist, dass es Phospho-ATF2 exprimiert.
• Für ELISA Platten mit dem Phospho-Peptid-Immunogen als positive Kontrolle beschichten und bei Bedarf die Kreuzreaktivität gegen das nicht-phosphorylierte Peptid validieren.
• Angesichts der Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte sollte die Sequenzausrichtung der Immunogenregion überprüft und die Leistung in den relevanten Spezies- und Gewebemodellen validiert werden.

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