Phospho-AMPKa1-T183/AMPKa2-T172 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, ELISA - Q13131 / P54646

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von AMPKα1/AMPKα2

• Die katalytische Alpha-Untereinheit 1 der 5'-AMP-aktivierten Proteinkinase (AMPKα1, kodiert durch PRKAA1) fungiert als hauptsächlicher Energiesensor in eukaryotischen Zellen und phosphoryliert eine Vielzahl von Substraten, um die metabolische Anpassung zu koordinieren. Verwandte Referenzen: PMID:17307971, PMID:17712357, PMID:24563466
• Es hemmt anabole Stoffwechselwege wie Protein-, Kohlenhydrat- und Lipidbiosynthese, während es katabolische Prozesse wie die Fettsäureoxidation und Glukoseaufnahme fördert – unter anderem durch direkte Phosphorylierung metabolischer Enzyme wie ACACA und HMGCR.
• AMPKα1 reguliert zudem die Genexpression durch Phosphorylierung von Transkriptionsregulatoren (z. B. CRTC2, FOXO3, SREBF1) und beeinflusst dadurch die Glukoneogenese, den Lipidstoffwechsel und Stressantworten. Verwandte Referenzen: PMID:11518699, PMID:11554766, PMID:15866171
• Über den Stoffwechsel hinaus steuert AMPKα1 Zellwachstum und Autophagie durch Hemmung von mTORC1 (Phosphorylierung von RPTOR, TSC2, FNIP1) und Aktivierung von ULK1, um das Überleben unter Nährstoffstress zu gewährleisten. Verwandte Referenzen: PMID:14651849, PMID:18439900, PMID:20160076, PMID:21205641, PMID:37079666
• AMPKα1 befindet sich im Zytoplasma, Kern und an späten Endosomen und shuttlelt dynamisch zwischen diesen Kompartimenten, um Ziele in verschiedenen Bereichen zu phosphorylieren – dies verbindet subzelluläre Lokalisation mit funktioneller Spezifität.
• AMPKα1 ist eine Serin/Threonin-Kinase und Phosphoprotein, deren Aktivität streng durch Phosphorylierung kontrolliert wird – insbesondere an Resten innerhalb der Aktivierungsschleife; zudem unterliegt es Ubiquitinierung und Acetylierung.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen, was potenziell zur gewebespezifischen Regulation und unterschiedlichen Signalergebnissen beiträgt.
• Das eng verwandte AMPKα2 (PRKAA2, SWISS P54646) weist hohe Homologie auf und wird ebenfalls von diesem Antikörper nachgewiesen, was eine kombinierte Analyse beider katalytischer Untereinheiten ermöglicht.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid, das den Resten um Thr183 des humanen PRKAA1 entspricht. Dieser Antikörper eignet sich zum Nachweis endogener Gehalte an phosphoryliertem AMPKα1 und AMPKα2 im Western Blot, wobei erwartete Banden bei etwa 64 kDa (AMPKα1) und 62–65 kDa (AMPKα2) auftreten.
• Verwenden Sie für Western Blots idealerweise phosphorylierungsspezifische Lysepuffer, die mit Phosphatase-Inhibitoren ergänzt sind, um das Phospho-Epitop zu erhalten und die Signalintensität zu optimieren.
• In ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz fungieren; fügen Sie phosphorylierte Peptidkontrollen hinzu und validieren Sie die Leistung gegenüber nicht phosphorylierten Gegenstücken, um die Spezifität sicherzustellen.
• Kreuzreaktivität mit Proben von Maus und Ratte ist aufgrund der hohen Sequenzkonservierung um die Phosphorylierungsstellen zu erwarten, aber überprüfen Sie den Nachweis immer in Ihrer spezifischen Probenmatrix und unter Ihren experimentellen Bedingungen.

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