Phospho-AKT2 spezifisch-S474 Kaninchen pAb - P31751

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: AKT2-Funktion und Lokalisierung

• AKT2 (RAC-beta Serin/Threonin-Proteinkinase, PKB beta) ist ein Mitglied der AKT-Kinasefamilie, die nachgeschaltete Effekte der PI3K-Signalübertragung vermittelt und Stoffwechsel, Proliferation, Überleben und Wachstum reguliert.
• AKT2 ist ein kritischer Regulator der insulin-stimulierten Glukoseaufnahme und Glykogensynthese. Es fördert die GLUT4-Translokation durch C2CD5-Phosphorylierung und hemmt GSK3A/B.
• AKT2 unterstützt das Zellüberleben durch Inaktivierung von pro-apoptotischem MAP3K5/ASK1 und durch Aktivierung der CREB1-abhängigen Transkription von BCL2 und MCL1.
• AKT2 wird für die SPATA13-vermittelte Regulation der Zellmigration und -adhäsion benötigt und könnte an der Plazentaentwicklung teilnehmen. Verwandte Referenzen: PMID:21432781 PMID:21620960
• Als Reaktion auf Lysophosphatidsäure unterdrückt AKT2 die Ziliogenese durch Phosphorylierung von WDR44 und RAB3IP. Verwandte Referenzen: PMID:31204173
• AKT2 phosphoryliert PKP1, verstärkt dessen Interaktion mit 14-3-3 und dessen Kern-Translokation und trägt so zur verringerten Adhäsion von Keratinozyten bei. Verwandte Referenzen: PMID:23444369
• AKT2 ist im Zytoplasma, Zellkern, Zellmembran und frühen Endosomen lokalisiert. Es wird weit verbreitet exprimiert, mit dokumentierter Expression in Myoblasten. Verwandte Referenzen: PMID:17565718

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper wurde gegen ein synthetisches phosphoryliertes Peptid hergestellt, das Ser474 von humanem AKT2 entspricht. Um die Phosphorylierungsspezifität zu bestätigen, sollten Phosphatase-behandelte Lysate oder Peptid-Konkurrenz-Assays in Betracht gezogen werden.
• Für Western Blotting können insulin-stimulierte Zelllysate (z.B. HepG2, 3T3-L1 differenzierte Adipozyten) als positive Kontrollen dienen. Ein Band nahe 56 kDa ist zu erwarten.
• Bei ELISA-Anwendungen kann das phosphorylierte Immunogen-Peptid als Beschichtungsantigen verwendet werden; die Kreuzreaktivität mit der nicht-phosphorylierten Form sollte bewertet werden.
• Da die Kreuzreaktivität derzeit nur für humanes AKT2 validiert ist, sollte die Reaktivität in anderen Spezies bei Bedarf überprüft werden.

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