Phospho-AKT1S1/PRAS40-T246 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q96B36

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: AKT1S1/PRAS40-Funktion und Lokalisation

• Prolinreiches AKT1-Substrat 1 (AKT1S1), auch allgemein als PRAS40 (40 kDa prolinreiches AKT-Substrat) bezeichnet, wird beim Menschen durch das AKT1S1-Gen kodiert.
• AKT1S1 fungiert als ein zentraler negativer Regulator des mechanistischen Targets von Rapamycin-Komplex 1 (mTORC1), einem zentralen Nährstoffsensor, der Zellwachstum und Biomasseakkumulation fördert. Es hemmt die mTORC1-Aktivität direkt, indem es die Substrat-Rekrutierungsstelle der MTOR-Kinase blockiert. Verwandte Referenzen: PMID:17277771, PMID:17386266, PMID:17510057, PMID:29236692
• Als Reaktion auf Insulin und Nährstoffe dissoziiert AKT1S1 von mTORC1, löst die Hemmung und ermöglicht so die mTORC1-Signalübertragung, ein Prozess, der eng mit seinem Phosphorylierungsstatus und seiner Assoziation mit 14-3-3-Proteinen verknüpft ist. Verwandte Referenzen: PMID:17386266, PMID:18372248, PMID:16174443
• AKT1S1 ist vorwiegend im Zytoplasma und Zytosol lokalisiert und wird in Geweben weit verbreitet exprimiert, wobei die höchsten Spiegel in Leber und Herz beobachtet werden. Bemerkenswerterweise ist seine Expression in Krebszelllinien wie A-549 und HeLa im Vergleich zu normalen Zelllinien oft erhöht.
• Das Protein unterliegt multiplen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung an mehreren Resten und Methylierung, und ist alternativem Spleißen unterworfen, was zu seiner funktionellen Regulation beiträgt.
• Über die metabolische Signalübertragung hinaus könnte AKT1S1 auch eine Rolle bei Nervenwachstumsfaktor-vermittelter Neuroprotektion spielen, obwohl diese Funktion hauptsächlich aus der Ähnlichkeit zu anderen Spezies abgeleitet wird.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde unter Verwendung eines synthetischen Phosphopeptids hergestellt, das der Thr246-Phosphorylierungsstelle entspricht. Um die phospho-spezifische Detektion aufrechtzuerhalten, sollten Sie die Verwendung von Phosphatase-Inhibitoren während der Zell-/Gewebelyse und Immunpräzipitationsschritte in Betracht ziehen.
• Für den Western Blot (WB) wird basierend auf dem berechneten Molekulargewicht von AKT1S1 ein Proteinband von etwa 27 kDa erwartet.
• Bei der Durchführung von ELISA können geeignete Peptidblockierung und phosphorylierte/nicht-phosphorylierte Peptidkontrollen helfen, die Spezifität für die T246-phosphorylierte Form zu bestätigen.
• Angesichts der ubiquitären Expression und konditionellen Phosphorylierung von AKT1S1 wird empfohlen, die Antikörperleistung im relevanten Proben-System (z. B. insulin-stimulierte versus ausgehungerte Zellen) zu validieren.

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