Phospho-AKT1-T308+AKT2-T309+AKT3-T305 Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P31749 / P31751 / Q9Y243

Kernspezifikationen und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von AKT1

• AKT1 ist eine von drei eng verwandten Serin/Threonin-Proteinkinasen (AKT1, AKT2, AKT3), die den Stoffwechsel, die Proliferation, das Zellüberleben, das Wachstum und die Angiogenese regulieren. Zugehörige Referenzen: PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136
• AKT1 phosphoryliert über 100 nachgeschaltete Substrate und vermittelt die Wirkungen von Wachstumsfaktoren wie Insulin, IGF1, PDGF und EGF. Zugehörige Referenzen: PMID:21432781 PMID:12176338 PMID:12964941
• Bei der Insulinsignalisierung fördert AKT1 die Glukoseaufnahme durch Auslösung der SLC2A4/GLUT4-Translokation und phosphoryliert GSK3A/B, um die Glykogensynthese zu stimulieren.
• AKT1 reguliert das Zellüberleben durch Phosphorylierung von MAP3K5/ASK1 an Ser-83, wodurch die durch oxidativen Stress induzierte Apoptose gehemmt wird. Zugehörige Referenzen: PMID:11154276
• AKT1 aktiviert mTORC1 durch Phosphorylierung von TSC2 an Ser-939 und Thr-1462, wodurch die Proteinsynthese und das Zellwachstum gefördert werden. Zugehörige Referenzen: PMID:12150915 PMID:12172553
• AKT1 phosphoryliert FOXO-Transkriptionsfaktoren (FOXO1, FOXO3, FOXO4), was zur 14-3-3-Bindung und zytoplasmatischen Sequestrierung führt, was die Zellproliferation und das Überleben fördert. Zugehörige Referenzen: PMID:10358075
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst das Zytoplasma, den Zellkern, die Zellmembran und den mitochondrialen Intermembranraum, wobei die Translokation je nach Reiz reguliert wird.
• Eine fehlerhafte AKT1-Aktivierung wird mit Krebs in Verbindung gebracht; die Expression nimmt bei Prostata- und Brustkrebs zu, und die Tyr-176-Phosphorylierung korreliert mit dem Malignitätsgrad.
• Die Phosphorylierung an Thr-308 in der Aktivierungsschleife ist für die AKT1-Kinaseaktivität erforderlich; diese Stelle ist in AKT2 (Thr-309) und AKT3 (Thr-305) konserviert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um Thr-308 des menschlichen AKT1; es wird erwartet, dass der Antikörper die phosphorylierten Formen von AKT1 (p-T308), AKT2 (p-T309) und AKT3 (p-T305) erkennt.
• Für Western Blot wird je nach Isoform und posttranslationalen Modifikationen eine Bande um 48–55 kDa erwartet; ziehen Sie die Verwendung von Phosphatase-Inhibitoren während der Probenvorbereitung in Betracht, um die Phosphorylierungen zu erhalten.
• Validieren Sie die Antikörperspezifität durch Behandlung der Proben mit Lambda-Phosphatase oder durch Verwendung einer nicht-phosphorylierten Peptidblockierung.
• Für ELISA kann der Antikörper zum Nachweis von phosphoryliertem AKT in Zelllysaten verwendet werden; titrieren Sie den Antikörper und verwenden Sie geeignete Phospho- und Gesamtproteinkontrollen.
• Die Kreuzreaktivität ist für Mensch und Maus angegeben; bei anderen Spezies kann eine empirische Validierung erforderlich sein.

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