Phospho-AKT1-T308 Kaninchen pAb - P31749

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: AKT1-Funktion und Lokalisierung

• AKT1 ist ein Mitglied der AKT-Serin/Threonin-Kinase-Familie, die durch Phosphorylierung zahlreicher Downstream-Ziele verschiedene zelluläre Prozesse vermittelt, darunter Stoffwechsel, Proliferation, Überleben, Wachstum und Angiogenese. Verwandte Referenzen: PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136 PMID:21432781

• Es spielt eine zentrale Rolle in der Insulin-Signalübertragung, indem es die Glukoseaufnahme über SLC2A4/GLUT4-Translokation fördert und die Glykogensynthese durch inhibitorische Phosphorylierung von GSK3A (Ser-21) und GSK3B (Ser-9) reguliert.

• AKT1 fördert die Proteinsynthese und das Zellwachstum, indem es TSC2 an Ser-939 und Thr-1462 phosphoryliert und so den mTORC1-Signalweg aktiviert. Verwandte Referenzen: PMID:12150915 PMID:12172553

• Es reguliert das Zellüberleben durch Hemmung pro-apoptotischer Faktoren: Phosphorylierung von MAP3K5/ASK1 an Ser-83 zur Unterdrückung von oxidativem Stress-induzierter Apoptose und Phosphorylierung von BAD zur Inaktivierung seiner pro-apoptotischen Funktion. Verwandte Referenzen: PMID:11154276 PMID:10926925

• AKT1 phosphoryliert FOXO-Transkriptionsfaktoren (FOXO1 an Thr-24, Ser-256, Ser-319; FOXO3 und FOXO4 an äquivalenten Stellen), was zu deren zytoplasmatischer Retention und Inaktivierung führt und die Zellproliferation fördert. Verwandte Referenzen: PMID:10358075

• Subzellulär lokalisiert AKT1 im Zytoplasma, Zellkern, Zellmembran und im mitochondrialen Intermembranraum, was mit seinen vielseitigen Signalrollen übereinstimmt.

• AKT1 ist in humanen Geweben weit verbreitet exprimiert, wobei die Proteinspiegel bei Prostata- und Brustkrebs erhöht sind, insbesondere die an Tyr-176 phosphorylierte Form zeigt eine erhöhte Expression während des Fortschreitens von Brustkrebs.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blotting sollten Insulin-stimulierte oder Wachstumsfaktor-behandelte Zelllysate als positive Kontrollen verwendet werden, und es sollten immer Phosphatase-Inhibitoren während der Probenvorbereitung enthalten sein, um die Phosphorylierung an Thr308 zu erhalten.
• Validieren Sie die Spezifität durch Vergleich des Signals mit einem Gesamt-AKT1-Antikörper und testen Sie den Antikörper im relevanten Modellsystem (human, Maus oder Ratte), um das erwartete Band bei ~56 kDa zu bestätigen.
• Für ELISA-Anwendungen sollten Sie die Detektion des phosphorylierten Peptids im Vergleich zum nicht-phosphorylierten Gegenstück überprüfen und Beschichtungskonzentrationen sowie Antikörperverdünnungen empirisch optimieren.

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