Phospho-AKT1-S129 Rabbit mAb für WB und ELISA - P31749

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: AKT1-Funktion und -Lokalisierung

• AKT1, auch bekannt als Proteinkinase B alpha (PKBα) oder RAC-PK-alpha, ist ein Mitglied der AKT-Kinase-Familie, die drei eng verwandte Isoformen (AKT1, AKT2, AKT3) umfasst, die eine zentrale Rolle bei der Regulierung des Stoffwechsels, der Zellproliferation, des Überlebens, des Wachstums und der Angiogenese spielen (PubMed:11882383, PubMed:15526160, PubMed:21432781).
  Verwandte Referenzen: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:21432781
• AKT1 phosphoryliert Downstream-Substrate, um die insulininduzierte Glukoseaufnahme zu vermitteln, indem es die Translokation von SLC2A4/GLUT4 fördert, und reguliert die Glykogensynthese durch Hemmung von GSK3A/B (PubMed:11994271).
  Verwandte Referenzen: PMID:11994271
• Es fördert das Zellüberleben, indem es pro-apoptotische Proteine wie MAP3K5/ASK1 (PubMed:11154276) und BAD (PubMed:10926925) phosphoryliert und hemmt, und indem es die CREB1-abhängige Transkription von anti-apoptotischen Genen wie BCL2 und MCL1 verstärkt (PubMed:9829964).
  Verwandte Referenzen: PMID:11154276, PMID:10926925, PMID:9829964
• AKT1 aktiviert den mTORC1-Signalweg durch Phosphorylierung von TSC2, CASTOR1 und DEPDC5 und reguliert so die Proteinsynthese und das Zellwachstum (PubMed:12150915, PubMed:12172553, PubMed:31548394, PubMed:33594058).
  Verwandte Referenzen: PMID:12150915, PMID:12172553, PMID:31548394, PMID:33594058
• AKT1 phosphoryliert FOXO-Transkriptionsfaktoren, was zu ihrer zytoplasmatischen Retention durch 14-3-3-Bindung führt, wodurch ihre pro-apoptotischen Funktionen und die Zellzyklusarrest-Funktionen gehemmt werden (PubMed:10358075).
  Verwandte Referenzen: PMID:10358075
• Subzellulär befindet sich AKT1 im Zytoplasma, im Zellkern, auf der Zellmembran und im mitochondrialen Intermembranraum, was seinen vielfältigen Signalrollen entspricht.
• AKT1 ist weitgehend in menschlichen Geweben exprimiert und häufig in Krebsarten, einschließlich Prostata- und Brustkrebs, überexprimiert oder hyperaktiviert, wobei seine Phosphorylierung an spezifischen Resten mit dem Krankheitsfortschritt korreliert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Bereiten Sie für Western Blots Lysate mit einer Phosphatase-Inhibitor-Cocktail-Mischung vor, um die Phosphorylierung an Ser129 zu erhalten, und erwägen Sie die Verwendung eines phosphospezifischen Lysepuffers.
• Validieren Sie die Spezifität durch einen Vergleich der Signale zwischen phosphatasebehandelten und unbehandelten Proben oder durch Verwendung einer nicht-phosphorylierten Peptid-Blockierungskontrolle.
• Stellen Sie in ELISA sicher, dass das Capture- oder Detektionsformat die Phosphorylierungsstelle S129 optimal exponiert; erwägen Sie eine Kombination mit einem Gesamt-AKT1-Antikörper zur Normalisierung.
• Der Antikörper wird gegen ein synthetisches Peptid von humanem AKT1 erhoben und reagiert vorhergesagt mit humanen Proben; die Kreuzreaktivität mit anderen Spezies sollte experimentell verifiziert werden.

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