Phospho-ACLY-S455 Kaninchen mAb für WB IHC-P ELISA – P53396

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ACLY

• ACLY (ATP-Citrat-Synthase) ist auch bekannt als ATP-Citrat-Lyase oder Citrat-Spaltungsenzym, das beim Menschen vom ACLY-Gen codiert wird.
• Die Hauptfunktion von ACLY besteht darin, die Spaltung von Citrat in Oxalacetat und Acetyl-CoA zu katalysieren und damit einen zentralen Substrat für den Lipid-, Kohlenhydrat- und Eiweißstoffwechsel bereitzustellen.
• ACLY dient als kritische Verbindung zwischen Glukosemetabolismus und De-novo-Lipogenese und liefert Acetyl-CoA für die Synthese von Fettsäuren und Cholesterin.
• Subzellulär ist ACLY überwiegend im Zytoplasma lokalisiert, wo es an metabolischen Reaktionen teilnimmt.
• Die Phosphorylierung an Serin 455 (Ser455) ist eine Schlüsselregulationsmodifikation, die die enzymatische Aktivität von ACLY steigert – oft über den Akt- oder PKA-Signalweg.
• Durch alternatives Spleißen des ACLY-Gens entstehen Isoformen, und das Protein unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen einschließlich Acetylierung und Ubiquitinierung, die seine Funktion und Stabilität beeinflussen.
• ACLY ist an dem Krebsstoffwechsel beteiligt: seine Hochregulierung unterstützt die Proliferation von Tumorzellen, wodurch es zu einem potenziellen therapeutischen Ziel wird.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Fügen Sie für die Western Blot-Analyse Phosphatase-Inhibitoren zu Ihrem Lysepuffer hinzu, um den Phosphorylierungsstatus zu erhalten. Validieren Sie die Antikörperspezifität durch Behandlung der Proben mit Lambda-Phosphatase.
• Optimieren Sie bei der Durchführung von IHC-P die Bedingungen für die Antigenrückgewinnung und ziehen Sie die Verwendung phosphospezifischer Kontrollen (blockierende Peptide oder mit Phosphatase behandelte Schnitte) in Betracht, um die Spezifität der Färbung zu bestätigen.
• Verwenden Sie den Antikörper bei ELISA-Anwendungen zum Nachweis von phosphoryliertem ACLY in Zell- oder Gewebelysaten und stellen Sie sicher, dass geeignete Positive und Negative Kontrollen enthalten sind.
• Das vorhergesagte Molekulargewicht von ACLY beträgt ca. 121 kDa; aufgrund von Isoformen oder Degradation können geringfügige Banden auftreten, was eine sorgfältige Validierung erfordert.

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