Phospho-ACC1/ACC2-S79 Rabbit PolymAb® für WB, IF/ICC, ELISA - Q13085 / O00763

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der Acetyl-CoA-Carboxylase 1/2

• ACC1 (Acetyl-CoA-Carboxylase 1, codiert durch ACACA) ist ein biotinabhängiges multifunktionalesEnzym, das die ATP-abhängige Carboxylierung von Acetyl-CoA zu Malonyl-CoA katalysiert, den ersten und geschwindigkeitsbestimmenden Schritt der de novo-Fettsäurebiosynthese. Verwandte Referenzen: PMID:20457939 PMID:20952656 PMID:29899443
• ACC2 (Acetyl-CoA-Carboxylase 2, codiert durch ACACB) ist ein homologes Isoform, das hauptsächlich die Fettsäureoxidation reguliert; der Antikörper erkennt eine konservierte Phosphorylierungsstelle, die sowohl ACC1 als auch ACC2 gemeinsam ist.
• Das Enzym lokalisiert sich vorwiegend im Zytoplasma / Zytosol.
• ACC1 wird in Gehirn, Plazenta, Skelettmuskel, Niere, Bauchspeicheldrüse und Fettgewebe exprimiert; es ist in geringen Mengen in der Lunge vorhanden und wird in der Leber nicht nachgewiesen.
• Als Phosphoprotein wird seine Aktivität durch Phosphorylierung an Schlüsselresten wie Ser79 (Nummerierung ACC1) moduliert, wodurch der zelluläre Energiestatus mit dem Lipidstoffwechsel verknüpft wird.
• Das Protein benötigt Biotin als Kofaktor und bindet ATP, Mg²⁺ oder Mn²⁺; es enthält eine Biotin-Carboxyl-Trägerdomäne, die für seine Funktion essentiell ist.
• Zusätzliche posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, und das Enzym unterliegt einer allosterischen Regulation.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid, das den Resten um Ser79 entspricht; Phosphatase-Inhibitoren sollten daher während der Probenvorbereitung zugesetzt werden, um das Phosphorylierungssignal zu erhalten.
• Für Western Blots beachten Sie das große vorhergesagte Molekulargewicht (~265 kDa); erwägen Sie die Verwendung von SDS-PAGE-Gelen mit niedriger Prozentsatz, verlängerte Transferzeiten und geeignete Molekulargewichtsmarker.
• Bei IF/ICC können optimierte Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen erforderlich sein, um eine robuste zytoplasmische Färbung zu erzielen.
• Bei der Durchführung eines ELISA überprüfen Sie die Phospho-Spezifität durch Vergleich der Bindung an phosphorylierte versus nicht-phosphorylierte Peptide oder nach Phosphatase-Behandlung der Proben.

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