PerCP/Cyanine5.5 Kaninchen-anti-Maus-CD4-monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie - P06332

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von CD4

• Das Ziel ist Maus-CD4 (CD4, ein T-Zell-Oberflächenglykoprotein), auch bekannt als L3T4 oder Ly-4. Es wurden zwei alternativ gespleißte Isoformen beschrieben, wobei Isoform 1 der kanonischen Sequenz entspricht (UniProt P06332).
• CD4 ist ein integrales Membran-Glykoprotein, das in T-Zellen als Korezeptor für MHC-Klasse-II-Moleküle fungiert, von extrazellulären Proteinen abgeleitete Peptide erkennt und dadurch eine wesentliche Rolle bei der adaptiven Immunität spielt.
• Bei der Bindung an MHC-Klasse-II:Peptid-Komplexe auf antigenpräsentierenden Zellen interagiert CD4 gleichzeitig mit dem T-Zell-Rezeptor (TCR) und rekrutiert die Src-Kinase LCK zum TCR-CD3-Komplex. Dadurch werden Signalkaskaden eingeleitet, die die Aktivierung von T-Helferzellen, die Zytokinproduktion und die Proliferation fördern.
• Neben der TCR-abhängigen Signalübertragung trägt CD4 auch zu TCR-/LCK-unabhängigen Funktionen in Makrophagen und NK-Zellen bei und beeinflusst deren Differenzierung, Aktivierung, Zytokinexpression und Zellmigration.
• CD4 ist für die Entwicklung von T-Helferzellen im Thymus von entscheidender Bedeutung und kann die Differenzierung von Monozyten in funktionell ausgereifte Makrophagen auslösen.
• Das Protein wird überwiegend auf der Zellmembran von T-Helferzellen exprimiert, die auf die Aktivierung zytotoxischer T-Zellen, die Regulation von B-Zellen und die Aktivierung von Phagozyten spezialisiert sind. Es kommt auch in anderen Immunzellen wie Makrophagen, dendritischen Zellen und NK-Zellen vor.
• Zu den wichtigen posttranslationalen Modifikationen gehören N-Glykosylierung, Palmitoylierung, Phosphorylierung und das Vorhandensein von Disulfidbrücken, die für die strukturelle Stabilität und Funktion des Proteins von Bedeutung sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das zur Herstellung dieses Antikörpers verwendete Immunogen umfasst die Aminosäuren 27–394 von Maus-CD4 (NP_038516.1) und deckt damit die gesamte extrazelluläre Domäne ab. Dieses Design begünstigt die Erkennung von nativem, auf der Zelloberfläche exprimiertem CD4.
• Dieser Antikörper ist für die Durchflusszytometrie (FC) validiert und wird als PerCP/Cyanine5.5-Konjugat geliefert. Dadurch ist der direkte Nachweis von Maus-CD4 auf lebenden Zellen ohne die Verwendung eines Sekundärantikörpers möglich.
• Berücksichtigen Sie beim Einrichten von Durchflusszytometrie-Experimenten eine Titration des Antikörpers, um die optimale Färbekonzentration für Ihren spezifischen Zelltyp und Ihr Instrument zu bestimmen. Verwenden Sie geeignete Isotypkontrollen und Vitalfarbstoffe, um ein präzises Gating sicherzustellen.
• Da CD4 auf T-Helferzellen und anderen Immunzellpopulationen exprimiert wird, sollte das Färbemuster in den relevanten Mausgewebe- oder Zellproben (z. B. Splenozyten, Thymozyten, PBMCs) überprüft werden. Ziehen Sie außerdem eine Ko-Färbung mit CD3 und CD8 in Betracht, um T-Zell-Subpopulationen zu unterscheiden.

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