PerCP/Cyanine5.5 Kaninchen anti-Human/Affe PD-1/CD279 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - Q15116

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PD-1-Funktion und -Lokalisierung

• Programmierter Zelltod-Protein 1 (PD-1, CD279) ist ein inhibitorischer Rezeptor, der auf antigengeschalteten T-Zellen exprimiert wird und eine kritische Rolle bei der Induktion und Aufrechterhaltung der immunologischen Toleranz gegenüber dem Selbst spielt. Verwandte Referenzen: PMID:21276005 PMID:31754127 PMID:32184441

• PD-1 übermittelt inhibitorische Signale nach Bindung an seine Liganden PD-L1 (CD274) und PD-L2 (CD273), was zur Dämpfung der T-Zell-Rezeptor-(TCR)-Signalgebung und zur Unterdrückung der T-Zell-Aktivierung führt. Verwandte Referenzen: PMID:21276005 PMID:26602187

• Nach der Ligandenbindung wird PD-1 in seinem ITSM-Motiv phosphoryliert, rekrutiert die Tyrosin-Phosphatase SHP-2 (PTPN11), die Schlüsselmoleküle der proximalen TCR-Signalgebung wie ZAP70, PKCθ und CD3ζ dephosphoryliert und so die T-Zell-Aktivierung direkt hemmt. Verwandte Referenzen: PMID:32184441

• Tumoren nutzen die inhibitorische Achse PD-1/PD-L1 aus, um der immunologischen Überwachung zu entkommen; die Wechselwirkung mit PD-L1 auf Tumorzellen hemmt die Effektorfunktionen der zytotoxischen T-Lymphozyten (CTL) und fördert das Immunescape. Verwandte Referenzen: PMID:28951311

• Die Blockade des PD-1-Signalwegs kehrt die Erschöpfung der T-Zellen um, stellt die antitumorale Immunität wieder her und bildet die mechanistische Grundlage für die Immun-Checkpoint-Inhibitor-Therapie in der Onkologie. Verwandte Referenzen: PMID:22658127 PMID:25034862 PMID:25399552

• PD-1 ist ein Typ-I-Transmembran-Glykoprotein, das auf der Zellmembran lokalisiert ist und zur Immunglobulin-Superfamilie gehört.

• Das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, N-verknüpfter Glykosylierung und Ubiquitinierung, die seine Expression und Signalaktivität modulieren.

• Sein intrazellulärer Schwanz enthält ein ITSM-Motiv, das für die Rekrutierung von SHP-2 essentiell ist, während die extrazelluläre Region eine Immunglobulin-V-ähnliche Domäne umfasst, die für die Ligandenwechselwirkung verantwortlich ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Titrieren Sie für die Durchflusszytometrie den Antikörper, um die optimale Arbeitskonzentration für Ihren Zelltyp und Ihre Versuchsbedingungen zu bestimmen. Verwenden Sie geeignete Isotyp-Kontrollen und Fc-Rezeptor-Blockierungsreagenzien, um unspezifische Bindungen zu minimieren.
• Validieren Sie die PD-1-Expression auf aktivierten menschlichen T-Zellen oder peripheren Blutzellen mononukleärer Zellen (PBMCs) von Cynomolgus-Affen als positives Kontrollsystem.
• Verwenden Sie nach Möglichkeit frisch isolierte Zellen und vermeiden Sie eine längere Stimulation, die die PD-1-Expression herunterregulieren könnte, um eine zuverlässige Färbung sicherzustellen.
• Bereiten Sie Einzelzellsuspensionen vor und filtern Sie diese vor der Messung, um Verstopfungen zu verhindern und hochwertige Daten zu gewährleisten. Führen Sie einen Ausschluss toter Zellen durch, um die Spezifität zu verbessern.
• Für multicolor-Panels bestätigen Sie die Kompatibilität des Fluorochroms und die Kompensationseinstellungen, da PerCP/Cyanine5.5 spektrale Überlappungen mit anderen roten Farbstoffen aufweist.

CamelBio: Ihre One-Stop-Beschaffungsbrücke

CamelBio bietet Diagnostikherstellern und Forschern eine optimierte, One-Stop-Beschaffungsplattform für IVD-Rohmaterialien, einschließlich validierter Antikörperpaare, optimierter monoklonaler und polyklonaler Antikörper, rekombinanter Proteine und Hilfsreagenzien. Unser Portfolio unterstützt speziell die Entwicklung von Immun-Checkpoint- und Onkologie-Biomarkern, mit zuverlässigen Antikörperlösungen für Ziele wie PD-1. Durch umfangreiche Lieferkettenfähigkeiten helfen wir, Ihre diagnostischen und Forschungsabläufe von der Konzeption bis zur Klinik zu beschleunigen.